[发明专利]一种水溶性功能红曲粉的制备方法

权利要求书

1.一种水溶性功能红曲粉的制备方法，其特征在于，具体包括：

第一阶段固态发酵，包括以下具体步骤：

（1）菌种活化：红曲菌纯种接入平板培养基，30℃培养5～10天活化菌种；

（2）一级种子液的制备：往活化好的菌种平板培养基中加入20毫升无菌生理盐水，用接种环来回剐蹭菌丝体洗刷孢子及菌丝制成平板种子液，按2%的接种量接种至种子培养基中，30℃，100rpm，培养48小时；

（3）二级种子液的制备：无菌条件下将一级种子液按10%的接种量接种至种子培养基中，30℃，100rpm，培养24小时；

（4）固态发酵：无菌条件下按重量比为8%～20%，将二级种子液接种至固态发酵培养基质中，搅拌均匀后按每袋装料350g～380g分装至食用菌栽培袋中，袋口用塞有透气棉的盖子旋紧；将栽培袋移入10万洁净度的高温房，培养温度30℃，湿度80-90%，每天打散，待物料表面开始变红后，转入10万洁净度的低温房，培养温度25℃，湿度40～60%，每三天打散一次，培养30天出料，将发酵好的物料转入烘干间，烘干温度55℃，待物料水分低于10%，粉碎物料，粉碎好的物料取样检测洛伐他汀含量，做好标记入库保存或直接用于提取；

第二阶段发酵产物的分离提取及制粉，包括以下具体步骤：

1）水浸提：将第一阶段制备的烘干粉碎后的红曲粉物料与纯化水按重量比为1:20～60的比例混合，55℃浸泡1～5小时，每隔15分钟搅拌一次，制得红曲粉水溶液；

2）板框压滤：将步骤1）的红曲粉水溶液通过高效高密度固液分离1mm工业滤布过滤，去除不溶物，收集清液；

3）超滤：将步骤2）所得清液进行膜过滤，收集滤液；所述膜为拦截率0.22微米-5000分子质量的有机膜；

4）纳滤：将步骤3）所得的滤液进行膜过滤，收集浓缩液，所述膜为拦截率1～2纳米-250分子质量的有机膜；

5）冻干：将步骤4）所得浓缩液按质量体积比为3～7%加入麦芽糊精溶解均匀后进行冻干，即得水溶性功能红曲粉；

6）冻干粉粉碎、检测、包装、成品出厂；

所述红曲菌在中国工业微生物菌种保藏管理中心的菌种保藏编号为41649；

第一阶段固态发酵中，所述平板培养基的制备为：50g马铃薯切成小块煮沸30分钟，两层纱布过滤，滤液加入5g葡萄糖，5g琼脂继续煮沸10分钟，冷却至室温后用纯化水定至250毫升，121℃，30分钟灭菌后分装至8块无菌平皿待用；

第一阶段固态发酵中，所述种子培养基的制备为：葡萄糖3～8% ,黄豆粉3～5%，硫酸镁0.1～0.3%，蛋白胨1～3%，甘油3～8%，磷酸二氢钾0.1～0.5%，硫酸钙0.1～0.3%，余量为水，pH用醋酸调制3.0～5.0，分装至1000毫升三角瓶内，装液量250毫升，121℃，30分钟灭菌后冷却待用；

第一阶段固态发酵中，所述固态发酵培养基质的制备：籼米粉50～80%，黄豆粉10～30%，麸皮粉5～20%，按每吨固体基质添加重量百分比25～40%的营养液混合均匀；将混合好的培养基质放入脉动真空灭菌器内，待设备温度显示125℃后开始计时，灭菌30～60分钟，灭菌结束完后冷却至室温，水分含量35～40%，用粉碎机对培养基质再次粉碎，物料松散无结块；所述籼米粉、黄豆粉、麸皮粉用粉碎机分别粉碎至50～100目待用；所述营养液的制备：蛋白胨2～5%，葡萄糖1～5%，酵母菌膏1～3%，玉米浆干粉0.5～2%，硫酸钙0.1%，余量为水，用醋酸调pH5.0，待用。