[发明专利]一种可用于恶性黑素瘤早期诊断的长链非编码RNA标志物及其应用

权利要求书

1.一种可用于恶性黑素瘤早期诊断的长链非编码RNA标志物，其特征在于，该长链非编码RNA标志物为Linc01296，其对应的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。

2.长链非编码RNA标志物Linc01296在制备恶性黑素瘤早期诊断试剂中作为目标RNA的应用。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述恶性黑素瘤早期诊断试剂为实时荧光定量PCR检测血清样本中Linc01296水平的试剂。

4.根据权利要求2或3所述应用，其特征在于，所述恶性黑素瘤早期诊断试剂包括特异性扩增Linc01296的引物。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的上游引物、下游引物。

6.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述恶性黑素瘤为皮肤恶性黑素瘤。

7.一种用于恶性黑素瘤早期诊断的检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒为检测血清中Linc01296表达水平的试剂盒，至少包括特异性扩增Linc01296基因的引物。

8.根据权利要求7所述用于恶性黑素瘤早期诊断的检测试剂盒，其特征在于，检测试剂盒为检测Linc01296的一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒，包括如下组分：

特异性引物、2×一步法反转录-荧光定量PCR混合液、热启动Taq酶、RTase逆转录酶和DEPC-ddH₂O；

其中所述的特异性引物包括：SEQ ID NO.2所示的上游引物，SEQ ID NO.3所示的下游引物；

所述2×一步法反转录-荧光定量PCR混合液包括SYBR Green II、dNTP、Mg²⁺及缓冲液。

9.根据权利要求8所述用于恶性黑素瘤早期诊断的检测试剂盒，其特征在于，所述一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒的荧光定量PCR体系为：

Linc01296或U6上游引物1μL，浓度15μmol/L；

Linc01296或U6下游引物1μL，浓度15μmol/L；

2×一步法反转录-荧光定量PCR混合液12.5μl；

热启动Taq酶1.5μl；

RTase逆转录酶0.5μL；

RNA模板0.1μg，DEPC-ddH₂O补齐至25μL；

一步法反转录-荧光定量PCR程序：50℃30min反转录；95℃2min预变性；40个循环：94℃20s变性；60℃20s退火；68℃20s延伸。