[发明专利]抗BTLA抗体药物组合物及其用途

说明书

本发明提供一种稳定的抗BTLA(B和T淋巴细胞弱化子)抗体的药物组合物及其在医药上的应用。该药物组合物含有抗BTLA抗体、缓冲液，还可以含有至少一种稳定剂，任选的还可以含有表面活性剂。

技术领域

本发明涉及治疗性药物组合物领域。尤其是，本发明涉及医药制剂领域，该药物组合物含有一种与B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)特异性结合的人源化抗体。

背景技术

正性和负性共刺激信号在B细胞和T细胞活性的调节中起决定性作用，而且已证实介导这些信号的分子是免疫调节剂的有效靶标。除T细胞受体(TCR)参与外，幼稚T细胞的最佳活化也需要正性共刺激，而负性共刺激则被认为是自身免疫耐受性的获得以及效应T细胞功能的终止所需要的。与抗原呈递细胞(APC)表面上的B7.1或B7.2相互作用时，原型T细胞共刺激分子CD28响应TCR参与而发出促进T细胞增殖和分化的信号，但是CD28同源物细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)介导T细胞增殖和效应子功能的抑制(Chambers等，Ann.Rev.Immunol.，19：565-594，2001；Egen等，Nature Immunol，3：611-618，2002)。已发现与B7家族同源的若干新分子(Abbas等，Nat.Med.，5：1345-6，1999；Coyle等，Nat.Immunol.，2：203-9，2001；Carreno等，Annu.Rev.Immunol.，20：29-53，2002；Liang等，Curr.Opin.Immunol.，14：384-90，2002)，并且刚开始阐明它们在T细胞活化中的作用。

B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)是CD28家族的成员，该家族还包括CD28、ICOS、CTLA-4和PD-1。根据加入单抗后对提高T细胞增殖的功能作用，发现了该家族最初的成员CD28和ICOS具有免疫激活作用(Hutloff等，1999)。而BTLA、CTLA-4和PD-1等被描述为负性调节蛋白。若干体内研究证实了BTLA在淋巴细胞应答中的抑制作用。由Murphy与同事(WashingtonUniversity St.Louis)制备的BTLA缺陷型小鼠在响应T依赖性抗原产生的IgG方面表现出3倍增加。另外，自BTLA^-小鼠分离的T细胞和B细胞对分别使用CD3-和抗IgM进行抗原-受体刺激显示较大的增殖应答(Watanabe，2003)。在过量表达研究中，发现BTLA与B细胞受体复合物以及与T细胞受体缔合。与该研究结果一致，在BTLA缺陷型淋巴细胞中，使用ConA(T细胞)或LPS(B细胞)进行抗原-受体非依赖性刺激不受影响，而且使用抗BTLA抗体也不能被调节。已经表明BTLA敲除小鼠随时间推移发生自发性自身免疫病，且寿命缩短(Oya，2008)。BTLA敲除小鼠显示在自身免疫性脑脊髓炎(EAE)和变应性气道炎症模型中疾病严重程度加剧，这两种模型均有赖于T细胞活性(Watanabe，2005；Deppong，2006)。

已经表明疱疹病毒进入介体(HVEM)是BTLA的配体(Scully等，2005)。HVEM是I型跨膜糖蛋白，属于TNF受体超家族的成员，带有4个胞外半胱氨酸富含区域(CDRs)，包含6个假性重复的半胱氨酸。BTLA及HVEM主要通过在细胞表面的动态表达来调节T细胞和APC的功能。BTLA与配体结合不仅抑制T细胞增殖，下调T细胞活化标志CD25，还可以抑制IFN-γ，IL-2，IL-4，和IL-10等的产生，但不能诱导细胞凋亡。HVEM与BTLA结合导致T细胞活化和增殖的下调(Sedy，2005)。这些研究结果表明，BTLA的表达或BTLA-HVEM结合情况与T细胞的活化与增值密切相关。