[发明专利]聚乙二醇在临床前安全性评价中的应用

说明书

本发明公开了聚乙二醇在临床前安全性评价领域中的应用。本发明利用聚乙二醇可诱导水溶液中大分子的聚集，可以按分子大小沉淀DNA，沉淀和纯化噬菌体颗粒和细胞或细菌原生质体融合的特点，通过在进行生物样品的蛋白沉淀和浓缩等前处理过程中，加入聚乙二醇与样本反应，达到有效的浓缩纯化抗体，增加耐药性，从而减少毒理恢复期样本的采集的目的。

技术领域

本发明涉及临床前安全性领域中的应用，特别是免疫原性生物分析领域中的应用，具体涉及聚乙二醇在临床前安全性评价领域中的应用。

背景技术

临床前的安全评价项目中，为了保证安全性，毒理实验动物给药浓度一般是临床用药的10-20倍。对于免疫原性分析方法而言，耐药性是该方法的关键指标。毒理给药浓度越高，理论血药浓度越高，耐药性就需要做的越高，对于免疫原性方法要求越高。

传统的免疫原性方法中，如果耐药性达不到给药阶段血药浓度，毒理项目只能增加恢复期阶段的采样点，来辅助判断给药期样本的结果。这种方式一则浪费人力物力采取恢复期样本，增加项目成本。二则，给药期的结果是通过恢复期的结果来辅助判断的，并不是准确结果。三则，传统的方法是用Plate（细胞培养板）来纯化抗体，该Plate（细胞培养板）耗材费用高，且加入样本后需要过夜孵育来达到纯化效果，由于板底空间有限，所以纯化效果有限，仍不能满足毒理项目需求。样本需要过夜反应，分析周期时间长。所以提高药物耐受性变得尤为重要，也是免疫原性方法的重中之重。

因此，本领域亟需研发一种成本低、纯化效果好、分析时间短、提高药物耐受性的新的免疫原性方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供聚乙二醇的新用途，具体为聚乙二醇在临床前安全性评价中的应用。为此，本发明提供一种利用聚乙二醇进行免疫原性生物分析的方法。采用本发明方法，可以有效的浓缩纯化抗体，增加耐药性，从而减少毒理恢复期样本的采集。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

本发明提供聚乙二醇在临床前安全性评价中的应用，尤其在免疫原性生物分析中的应用。

聚乙二醇（简称PEG）是非离子型的水溶性聚合物，它能与许多极性较高的物质配伍，具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等，在化妆品工业和制药工业中的应用很广泛。在分子生物学中，聚乙二醇可诱导水溶液中大分子的聚集，可以按分子大小沉淀DNA，沉淀和纯化噬菌体颗粒和细胞或细菌原生质体融合。基于以上特性，我们在进行生物样品的蛋白沉淀和浓缩等前处理过程中加入聚乙二醇，使聚乙二醇与大分子抗原抗体充分反应，可得到纯化的目标抗体，起到纯化浓缩的作用。

本发明还提供一种利用聚乙二醇进行免疫原性生物分析的方法，该方法采用如下纯化方法：在进行生物样品的蛋白沉淀和浓缩等前处理过程中加入聚乙二醇，使聚乙二醇与大分子抗原抗体充分反应，得到纯化的目标抗体。该纯化方法具体包括如下步骤：

I.制备PBS溶液，在PBS溶液中加入聚乙二醇，配制聚乙二醇溶液；

II. 分别配制灵敏度样本和药物耐受样本，在灵敏度样本和药物耐受样本中分别加入步骤I的聚乙二醇溶液，室温孵育，使聚乙二醇与大分子抗原抗体充分反应；

III.离心将目标物沉降，吸去上清液，获得纯化的目标抗体。

作为本发明优选的技术方案，步骤I中，配制聚乙二醇溶液的方法具体为：称取3g~6g聚乙二醇溶于100mL 的PBS溶液中，配制成3%~6%的聚乙二醇溶液。