[发明专利]一种过氧麦角甾醇的制备与检识方法

说明书

本发明公开了一种过氧麦角甾醇的制备与检识方法，制备方法包括流份制备、过氧麦角甾醇的检识、精制过程。本发明通过对HPTLC显色剂与UHPLC‑ESI‑MS检索条件筛选提高过氧麦角甾醇检识的精准度，根据检识结果对含有过氧麦角甾醇流份进行提取能有效避免制备失误情况，提高过氧麦角甾醇制备的准确率与效率，并且整个制备方法简单易行，适合工业化生产。而且本发明研究显示，过氧麦角甾醇能有效抑制肺癌、食道癌、胃癌细胞增长及改善胰岛素抵抗，可用于制备相应抗肿瘤及降血糖的药物；本发明技术对于过氧麦角甾醇开发成抗肿瘤及降血糖药物具有重要的应用前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域。更具体地，涉及一种过氧麦角甾醇的制备与检识方法。

背景技术

过氧麦角甾醇全称为3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯，结构式如式 (Ⅰ)所示：

现有技术中制备过氧麦角甾醇的方法主要为先分离未知单体后鉴别过氧麦角甾醇，如专利201210233192.1利用酶法破壁孢子粉经超临界二氧化碳萃取，先后以氯仿、乙酸乙酯、石油醚-乙酸乙酯混合溶剂、石油醚-丙酮混合溶剂等为洗脱剂，经3次正向硅胶柱分离，最终再采用制备色谱精制获得活性最高的单体成分，鉴别为过氧麦角甾醇。专利200610126091.9以簇生沿丝伞子实体或菌丝体为原料，通过甲醇提取，石油醚萃取，上正向硅胶柱，环己烷-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，合并相同流分，经多次重结晶获得两个单体，其中一个鉴别为过氧麦角甾醇。

然而，这种从未知出发先获得单体，再鉴定出是过氧麦角甾醇容易出现误判，如章能胜等(玫烟色拟青霉中过氧麦角甾醇的高速逆流色谱法分离纯化及质谱分析，食品与发酵工业，2009，35(6):14-16.)采用较为先进的高速逆流色谱法对玫烟色拟青霉中过氧麦角甾醇进行分离纯化，但其获得的目标产物并非是真正的过氧麦角甾醇，因为过氧麦角甾醇在240-400nm无紫外吸收，而文中分离过程的监视和目标物的纯度检测均采用280nm紫外吸收波长，且在色谱图中均显示出较大的吸光度，可能是作者误判。

上述摸索式分离的制备方法不仅容易出现误判，造成人力与物料的浪费，并且制备工艺复杂，不适合工业化生产。

发明内容

针对现有技术存在的技术缺陷，本发明的目的是提供一种新的过氧麦角甾醇制备方法，通过先对流份中过氧麦角甾醇精准检识，再根据检识结果提取过氧麦角甾醇，该种对过氧麦角甾醇的针对性提取方法能大大降低错误率，避免盲目性，并且整个过程简便易行，适合工业化生产。

本发明的目的是提供一种过氧麦角甾醇的制备方法。

本发明另一目的是提供一种过氧麦角甾醇的检识方法。

本发明另一目的是提供过氧麦角甾醇在制备抗肿瘤药物及降血糖药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种过氧麦角甾醇的制备方法，包括以下步骤：

(1)流份制备：将兰科开唇兰属植物的干药材粉碎，乙醇提取浓缩、有机溶剂萃取得浸膏，通过层析柱洗脱得流份；

(2)过氧麦角甾醇的检识：对所述流份进行HPTLC检识和/或 UHPLC-ESI-MS检识；

(3)过氧麦角甾醇的精制：根据步骤(2)的检识结果，选择含有过氧麦角甾醇的流份合并，经过柱层析后重结晶得到过氧麦角甾醇成品。

优选地，所述兰科开唇兰属植物包括小片齿唇兰、短柱齿唇兰、滇南开唇兰、白齿唇兰、滇越金线兰、红萼齿唇兰、小齿唇兰、西南齿唇兰、峨眉金线兰、台湾银线兰、耿马齿唇兰、台湾齿唇兰、恒春银线兰、齿唇兰、艳丽齿唇兰、屏边金线兰、金线兰、保亭金线兰(变种)、一柱齿唇兰、香港金线兰、浙江金线兰。