[发明专利]抗生素lobophorin及其制备方法和应用

权利要求书

1.如式（I）所示任一化合物：

式（I）

其中，化合物4为LOB H4，R₁为NO₂，R₂为NH₂，R₃为H；化合物7为LOB H7，R₁为NO₂，R₂为NO₂，R₃为H；化合物12为LOB H12，R为NO₂；化合物13为LOB H13，R为NH₂。

2.一种制备权利要求1中所述的化合物的方法，其特征在于，

分别制备重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5560和重组突变菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5561的发酵培养物，将发酵培养物的发酵液和菌丝体分开；发酵液经大孔树脂吸附，后用丙酮洗脱，减压浓缩回收丙酮，剩余的水相用丁酮萃取，再减压浓缩至干得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，减压浓缩回收丙酮，剩余的水相用丁酮萃取，减压浓缩至干得到浸膏B；将浸膏A和浸膏B合并得到粗提物，由此分别得到重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5560的粗提物和重组突变菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5561的粗提物；

将重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5560的粗提物经正相硅胶柱层析分离，用氯仿/甲醇梯度洗脱从体积比为1:0、4:1、2:1和0:1梯度洗脱，顺序得到4个馏分Fr.1-Fr.4；将Fr.1和Fr.2两个馏分合并，经Sephdex LH-20凝胶柱分离，以氯仿/甲醇体积比1:1等度洗脱，洗脱馏分经纯化得到化合物LOB H7和化合物LOB H4；

将重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5561的粗提物并经正相硅胶柱层析分离，用氯仿/甲醇梯度洗脱从体积比为1:0、4:1、2:1、3:1和0:1梯度洗脱，顺序得到5个馏分Fr.1到Fr.5；将Fr.2-Fr.5合并后，经Sephdex LH-20凝胶柱分离，以氯仿/甲醇体积比1:1等度洗脱，洗脱馏分经纯化得到化合物LOB H12和化合物LOB H13；

所述的重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5560，其是将包含lobophorin生物合成基因簇的BAC质粒导入到异源宿主streptomyces coelicolor M1154中得到重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5560；

所述的重组突变株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5561的构建方法，其是将lobophorin生物合成基因簇中的糖基转移酶基因lobG1缺失后的质粒再导入到异源宿主streptomyces coelicolor M1154中得到重组菌株streptomyces coelicolor M1154/pCSG5561。