[发明专利]用于制备高活性纳豆激酶的菌株SWS-001及其应用

说明书

本发明公开了一种用于制备高活性纳豆激酶的菌株SWS‑001及其应用，菌株的保藏号为CGMCC NO：17226。利用上述微生物菌株SWS‑001对纳豆进行浅盘固体发酵：将装好盘的大豆装入发酵箱，120±5℃饱和蒸汽灭菌；灭完菌后待物料温度降到50±5℃时开始接种纳豆芽孢杆菌种液，接种完毕后开始纳豆发酵，温度为36±2℃，湿度为85‑95%，发酵时间为24‑26小时；能够制备具有抗心脑血管疾病活性的生物制品。

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，尤其是一种适用于生产纳豆的微生物菌株及其应用。

背景技术

随着人们饮食习惯的改变和环境污染的影响，心脑血管病已经跃居人类死亡疾病的前列，严重威胁人类的健康。栓塞性血管阻塞在冠心病、中风等临床重病的发病机制中起着主要作用，多数大幅度降低患者的生活质量，严重时会造成患者死亡或致残，一般临床治疗血栓主要依靠溶栓剂如尿激酶(UK)、组织型纤维酶原激活剂(t-PA)等，多采用静脉输液方式，具有价格昂贵、出血倾向或半衰期短的缺点。

研究发现，纳豆含有可以溶解血液中纤维蛋白的纤溶酶-纳豆激酶，同时由于纳豆来源于传统食品，安全无副作用，具有口服有效、半衰期长等优点。

目前，通过生物发酵工程制备具有良好生物活性的纳豆产品，成为本领域的研究热点，但是能标准化、批次生产纳豆产品也是相关企业的难点。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种生产纳豆的高效发酵菌株，能够获得具有较高纳豆激酶生物活性的纳豆发酵制品。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。

用于制备高活性纳豆激酶的菌株SWS-001，其名称为Bacillus natto.SWS-001，属于纳豆芽孢杆菌Bacillus natto，保藏日期2019年1月23日，保藏号CGMCC NO：17226；其主要生物学特征包括：革兰氏染色阳性G+,细胞为杆状，芽孢椭圆形或柱状，革兰氏染色阳性，接触酶阳性，V.P.反应阳性，硝酸盐还原阳性，D-木糖发酵阳性，D-葡萄糖发酵阳性，明胶液化阳性，淀粉水解阳性，菌落形态乳白不透明圆形；发酵纳豆产生具有高活性纳豆激酶的生物制品。

利用所述的微生物菌株SWS-001对纳豆进行浅盘固体发酵，制备具有抗心脑血管疾病的纳豆激酶活性生物制品。

作为本发明的一种优选技术方案，该方法包括如下步骤：

C、纳豆浅盘固体发酵：

C-3、大豆灭菌及发酵：将装好盘的大豆装入发酵箱，120±5℃饱和蒸汽灭菌；灭完菌后待物料温度降到50±5℃时，接入纳豆芽孢杆菌种子液，然后开始纳豆发酵，温度为30±2℃，湿度为75-78％，发酵时间为30小时，30小时后从视镜观察豆子表面有大量白色拉丝状物质即为发酵终点。

C-1、大豆预处理：将大豆用清水洗涤1-2次，大豆：水＝1：0.8w/V，再用清水浸泡，大豆：水＝1：1.8w/V，在室温浸泡24h，大豆充分膨胀；

C-2、湿大豆装盘：将浸泡好的大豆沥去水份，平铺在带小孔的发酵托盘上，托盘上铺一层纱布以保持水份。

作为本发明的一种优选技术方案，在步骤C之前还包括如下步骤：

A、菌种斜面制备及菌种活化：

A-1、培养基制备：按如下配方制备PB培养基：牛肉膏0.5％，酵母粉1.0％，磷酸氢二钠0.5％，磷酸二氢钠0.5％，琼脂2％；将斜面培养基加热溶化后调pH到7.0－7.8，然后分装茄子瓶或试管，放入灭菌锅内湿热灭菌，冷却后制成斜面备用；

A-2、菌种活化与扩大培养：用接种环在无菌条件下从原菌种斜面上挑取菌苔，于试管斜面或茄子瓶斜面内进行划线，然后置30±1℃恒温箱内培养24小时，存放备用。