[发明专利]用于制备高活性纳豆激酶的菌株SWS-001及其应用有效

专利信息
申请号: 202010056538.X 申请日: 2020-01-18
公开(公告)号: CN111088196B 公开(公告)日: 2022-04-22
发明(设计)人: 董超;史延茂 申请(专利权)人: 河北省科学院生物研究所
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/54;C12R1/07
代理公司: 石家庄轻拓知识产权代理事务所(普通合伙) 13128 代理人: 侯迎新
地址: 050081 河北*** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 用于 制备 活性 激酶 菌株 sws 001 及其 应用
【权利要求书】:

1.用于制备高活性纳豆激酶的菌株SWS-001,其名称为Bacillus natto.SWS-001,属于纳豆芽孢杆菌Bacillus natto,保藏日期2019年1月23日, 保藏号CGMCC NO:17226;其主要生物学特征包括:革兰氏染色阳性G+,细胞为杆状,芽孢椭圆形或柱状,革兰氏染色阳性,接触酶阳性,V.P.反应阳性,硝酸盐还原阳性,D-木糖发酵阳性,D-葡萄糖发酵阳性,明胶液化阳性,淀粉水解阳性,菌落形态乳白不透明圆形;发酵过程产生具有高活性纳豆激酶的生物制品。

2.利用权利要求1的菌株制备具有高活性纳豆激酶生物制品的方法,其特征在于:利用所述的微生物菌株SWS-001对大豆原料进行浅盘固体发酵,制备具有抗心脑血管疾病功能的生物制品;

该方法包括如下步骤:

C、纳豆浅盘固体发酵:

C-3、大豆灭菌及发酵:将装好盘的大豆装入发酵箱,120±5℃饱和蒸汽灭菌;灭完菌后待物料温度降到50±5℃时,接入纳豆芽孢杆菌种子液,然后开始纳豆发酵,温度为30±2℃,湿度为75-78%,发酵时间为30小时,30小时后从视镜观察豆子表面有大量白色拉丝状物质即为发酵终点。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:在步骤C-3之前还包括如下步骤:

C-1、大豆预处理:将大豆用清水洗涤1-2次,大豆:水=1:0.8w/V ,再用清水浸泡,大豆:水=1:1.8 w/V,在室温浸泡24h,大豆充分膨胀;

C-2、湿大豆装盘:将浸泡好的大豆沥去水份,平铺在带小孔的发酵托盘上,托盘上铺一层纱布以保持水份。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:在步骤C之前还包括如下步骤:

A、菌种斜面制备及菌种活化:

A-1、培养基制备:按如下重量份数比配方制备PB培养基:牛肉膏0.5%,酵母粉1.0%,磷酸氢二钠0.5%,磷酸二氢钠0.5%,琼脂2%;将斜面培养基加热溶化后调pH到7.0-7.8,然后分装茄子瓶或试管,放入灭菌锅内湿热灭菌,冷却后制成斜面备用;

A-2、菌种活化与扩大培养:用接种环在无菌条件下从原菌种斜面上挑取菌苔,于试管斜面或茄子瓶斜面内进行划线,然后置30±1℃恒温箱内培养24小时,存放备用。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:在步骤A之后还包括如下步骤:

B、种子液培养:

B-1、种液培养基的配制:牛肉膏0.5%w/w,酵母粉1.0%w/w,磷酸氢二钠0.5%w/w,磷酸二氢钠0.5%w/w,调pH到7.0-7.8,灭菌备用;

B-2、接种及培养:取茄子瓶斜面或试管斜面,用接种环接菌苔于种子液内,恒温摇床内振荡培养,30±3℃、250 rmp,培养6小时;种子液镜检合格后,4℃保存备用。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:在步骤C之后还包括如下步骤:

D、纳豆冻干粉的制备:

D-1、鲜纳豆的冷冻干燥:将发酵好的纳豆无菌操作放入冻干机内进行冻干,工艺程序为:-40℃---5小时,0℃---20小时,30℃---16-18小时;到终点时物料温度和搁板温度相差小于等于5℃;

D-2、纳豆粉碎及过筛:将冻干后纳豆放入带冷却装置的粉碎机进行粉碎,过筛得纳豆冻干粉。

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