[发明专利]一种基于肠道菌群的枣花花蜜导致蜜蜂毒性效应的研究方法

说明书

本发明属生物技术及农业技术领域，针对现有研究不能阐释枣花花蜜对蜜蜂的毒性作用的现状，提供一种基于肠道菌群的枣花花蜜导致蜜蜂毒性效应的研究方法；基于枣花花蜜对蜜蜂微生物肠道菌群的改变及差异菌的功能分析，以挖掘枣花花蜜对蜜蜂枣花病发生的机理，为蜜蜂枣花病的防治提供依据。采集蜜蜂肠道粪便中的微生物DNA，用Hiseq2500 PE250测序平台，基于细菌16s rDNA V3‑V4可变区，探究枣花花蜜对蜜蜂肠道菌群的调节，明确枣花病组中上调或下调的菌属。阐明枣花花蜜通过改变肠道菌群抑制外源物质的生物降解和解毒通路、上调生物碱氨基酸生物合成，对蜜蜂产生毒性作用的机制，应用于通过蜜蜂枣花病防治中靶标的选择。

技术领域

本发明属于生物技术及农业技术领域，具体涉及一种基于肠道菌群的枣花花蜜导致蜜蜂毒性效应的研究方法。

背景技术

蜜蜂枣花病又称蜜蜂枣花中毒，发生于枣树开花的流蜜期，是我国华北地区枣花流蜜期的一种地方性病害。蜜蜂采集枣花蜜后，出现腹部膨大，失去飞翔能力，两翅平伸或竖起，在巢门外作跳跃式爬行等症状，随着中毒加深，病蜂仰卧在地，腹部抽搐，最后痉挛而死。发病后大批采集蜂死亡，蜂群群势下降，大发生年份，蜂群可减少1/3-1/2，严重影响枣花期蜂蜜的产量。

关于蜜蜂枣花病的发病机理目前研究较少，一般认为，枣花病发病原因主要是气候干旱、蜜汁浓稠以及工蜂劳动量过大等引起。李晓立等认为蜜蜂枣花病的发生与枣花蜜中钾离子含量显著相关。虽然这些学者从不同角度对枣花病发生的可能因素做了有益探索，但枣花蜜对蜜蜂的毒性作用机理并不清晰。

蜜蜂有一个高度专业化、简单和一致的肠道微生物群，其中8种菌为优势菌，占蜜蜂肠道微生物群的95-99%。这些菌包括Snodgrassella alvi、Giliamella apicola、Bartonella apis、Frischella perrara、Lactobacillus Firm-4、Lactobacillus Firm-5、Bifidobacillum asteroides和Parascchariberapium。蜜蜂的这些肠道菌可能参与营养过程，如分解和利用花粉粒以及降解环境中发现的有毒化合物等。然而，肠道菌群的进化会受到各种因素（如环境、生理特性和食物等）的影响，其中食物被认为是影响肠道细菌群落结构和数量的最重要因素之一。因此枣花花蜜可能会通过改变微生物群落的结构和功能，从而影响蜜蜂的肠道功能进而影响蜜蜂的整体健康。由于蜜蜂在农业和经济上的重要性，了解枣树花蜜如何影响蜜蜂共生微生物肠道菌群的组成，进而影响其健康至关重要。因此，建立一种蜜蜂枣花病相关的肠道菌群及其防治靶标的预防方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是针对现有研究不能阐释枣花花蜜对蜜蜂的毒性作用的现状，提供一种基于肠道菌群的枣花花蜜导致蜜蜂毒性效应的研究方法；基于枣花花蜜对蜜蜂微生物肠道菌群的改变及差异菌的功能分析，以挖掘枣花花蜜对蜜蜂枣花病发生的机理，为蜜蜂枣花病的防治提供依据。