[发明专利]抗MRJP4的配对单克隆抗体、检测MRJP4的ELISA试剂盒和胶体金免疫试纸有效
申请号: | 202010049812.0 | 申请日: | 2020-01-16 |
公开(公告)号: | CN111060698B | 公开(公告)日: | 2020-12-22 |
发明(设计)人: | 胡菡;魏俏红;陈思;冯毛;孟丽峰;韩宾;房宇;马川;李建科 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蜜蜂研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/535;G01N33/558 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人: | 余光军;杨惠 |
地址: | 100093*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | mrjp4 配对 单克隆抗体 检测 elisa 试剂盒 胶体 免疫 试纸 | ||
1.配对的抗MRJP4单克隆抗体,其特征在于,由微生物保藏编号为CGMCC No. 17294的杂交瘤细胞株6H9分泌的抗MRJP4单克隆抗体和微生物保藏编号为CGMCC No. 17295的杂交瘤细胞株8C9分泌的抗MRJP4单克隆抗体组成。
2.权利要求1所述的配对的抗MRJP4单克隆抗体在定性检测样品中是否含有MRJP4或定量检测样品中MRJP4含量的用途。
3.一种检测MRJP4含量的酶联免疫试剂盒,包括:抗MRJP4的一抗,生物素标记的抗MRJP4的二抗,标准品,辣根过氧化物酶标记亲和素,生物素标记抗体稀释液,辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液,样本稀释液,浓洗涤液,底物溶液和终止液;其特征在于:所述的一抗是权利要求1所述的杂交瘤细胞株6H9分泌的抗MRJP4单克隆抗体,所述的二抗是权利要求1所述的杂交瘤细胞株8C9分泌的抗MRJP4单克隆抗体;或者所述的一抗是权利要求1所述的杂交瘤细胞株8C9分泌的抗MRJP4单克隆抗体,所述的二抗是权利要求1所述的杂交瘤细胞株6H9分泌的抗MRJP4单克隆抗体。
4.一种检测MRJP4的胶体金免疫检测试纸,包括:金标垫,含有检测线和质控线的NC膜,样本垫,吸水垫和检测底板;其特征在于,所述的金标垫含有权利要求1所述杂交瘤细胞株6H9分泌的单克隆抗体与胶体金的结合物;所述的NC膜含有一条检测线和一条质控线;所述的检测线由权利要求1所述的杂交瘤细胞株8C9分泌的单克隆抗体组成,所述的质控线由羊抗鼠IgG抗体组成;或者,所述的金标垫含有权利要求1所述的杂交瘤细胞株8C9分泌的单克隆抗体与胶体金的结合物;所述的NC膜含有一条检测线和一条质控线;所述的检测线由权利要求1所述的杂交瘤细胞株6H9分泌的所述的单克隆抗体组成,所述的质控线由羊抗鼠IgG抗体组成。
5.按照权利要求4所述的胶体金免疫检测试纸,其特征在于,所述的金标垫的制备方法,包括:
(1)将胶体金溶液与杂交瘤细胞株6H9分泌的或杂交瘤细胞株8C9分泌的单克隆抗体结合得到胶体金-抗体结合物原液;
(2)用工作液将胶体金-抗体结合物溶液稀释后均匀加在玻璃纤维膜上,烤干,即得金标垫。
6.按照权利要求5所述的胶体金免疫检测试纸,其特征在于,步骤(1)中将杂交瘤细胞株6H9分泌的或杂交瘤细胞株8C9分泌的单克隆抗体与胶体金溶液在pH值为7.4时进行结合;步骤(2)中用工作液将胶体金-抗体结合物溶液按照1:4的体积比进行稀释后均匀加在玻璃纤维膜上。
7.按照权利要求4所述的胶体金免疫检测试纸,其特征在于,杂交瘤细胞株6H9分泌的或杂交瘤细胞株8C9分泌的单克隆抗体在检测线上的工作浓度为2 mg/mL,羊抗鼠IgG抗体在质控线上的工作浓度为1 mg/mL。
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