[发明专利]沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用

说明书

本发明公开了一种沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用；所述噬菌体命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonella Typhimurium Bacteriophage)LPST144；本发明的沙门氏菌噬菌体LPST144及其裂解酶LysT15，能够裂解沙门氏菌；由于采用噬菌体及其裂解酶特异性裂解沙门氏菌能够防止沙门氏菌进化和减少耐药菌株的产生；由于本发明噬菌体菌株及其裂解酶均有亲水相，通过传统方法很容易配置成喷洒液或是淋洗液，对环境或器具消毒；由于本发明涉及到的噬菌体及其裂解酶没有毒副作用，可以作为食品添加剂，具有应对食品污染的潜在应用。

技术领域

本发明涉及沙门氏菌噬菌体领域，具体涉及一种沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用。

背景技术

沙门氏菌是一种革兰氏阴性杆菌，兼性厌氧型，属于肠杆菌科。根据世界卫生组织(WHO)显示，食用受病原微生物污染的食物和水导致全世界每年约180万人死亡，其中沙门氏菌是导致感染的主要原因，主要通过污染的食物和水以及携带沙门氏菌的动物进行传播，鸡蛋和蛋制品也是导致沙门氏菌疾病的主要来源之一。目前，已报道沙门氏菌共有2500多个血清型，其中，与人类感染疾病相关的最常见血清型是鼠伤寒沙门氏菌(SalmonellaTyphimurium)和肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis)。在我国，每年至少有200万人因感染沙门氏菌而住院甚至死亡。综上所述，控制食品中沙门氏菌的污染是减少由沙门氏菌导致的食源性疾病的有效措施。

噬菌体(Bacteriophage)是一类能够特异性感染细菌的病毒。噬菌体是没有任何代谢机制的生物体，通过细菌的遗传物质复制增殖。一方面，噬菌体只感染细菌，仅有蛋白和核酸，对人体无害，用噬菌体防治食源性病原菌无内源性危害。另一方面，噬菌体不会影响食品的性质，如风味、质地和营养成分等，这使得噬菌体成为应用于食品中有吸引力的替代生物制剂。但是在单一噬菌体培养液中，很容易诱导细菌会对噬菌体产生抗性，从而不能有效裂解细菌。裂解酶，是双链DNA噬菌体感染细菌后期编码的一类肽聚糖水解酶，裂解酶能直接靶向细菌细胞壁的肽聚糖，破坏细菌细胞壁结构的完整性使细胞壁渗透压不平衡从而导致细菌裂解。因此，噬菌体来源的生物抗菌物质(如裂解酶)可以作为一类新型抗生素替代品。

目前，关于噬菌体裂解酶的应用主要是裂解革兰氏阳性菌，比如金黄色葡萄球菌、李斯特菌、肠球菌等；在革兰氏阴性菌的细胞结构中，其肽聚糖层外存在一层细胞外膜结构，该结构阻碍噬菌体裂解酶进入细菌，无法裂解细菌，因此细胞外膜松散剂可以作为透膜剂协助裂解酶进入革兰氏阴性菌发挥裂菌作用。

综上所述，迫切需要找到一株高效裂解沙门氏菌的噬菌体，开发其裂解酶，对控制沙门氏菌及其污染具有潜在的应用价值。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用。

为实现上述目的，本发明所设计一种沙门氏菌噬菌体LPST144，所述噬菌体命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonella Typhimurium Bacteriophage)LPST144；于2019年7月9日将该噬菌体LPST144保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武汉大学，保藏编号为：CCTCC NO：M 2019533，保藏日期为：2019年7月9日。

上述沙门氏菌噬菌体LPST144在特异性裂解沙门氏菌中的应用。

上述沙门氏菌噬菌体LPST144在制备裂解酶LysT15中的应用。

本发明还提供了一种沙门氏菌噬菌体裂解酶LysT15，其氨基酸序列为SED IDNo.1。

编码上述沙门氏菌噬菌体裂解酶的基因ORF15，其核苷酸序列如SED ID No.2。