[发明专利]沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用有效

专利信息
申请号: 202010036628.2 申请日: 2020-01-14
公开(公告)号: CN111139225B 公开(公告)日: 2021-03-23
发明(设计)人: 王小红;丁一峰;王佳;杨其乐;聂若男;黄晨曦;李亚萌;庞倩 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;A01N63/40;A01N63/50;A01P1/00;C12R1/92;C12R1/19
代理公司: 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 代理人: 王和平;冯超
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 沙门氏菌 噬菌体 lpst144 及其 裂解 抗菌 应用
【权利要求书】:

1.一种沙门氏菌噬菌体裂解酶LysT15,其氨基酸序列为SED ID No.1。

2.一种编码权利要求1所述沙门氏菌噬菌体裂解酶的基因ORF15,其核苷酸序列如SEDID No.2。

3.一种重组表达载体pET28b-ORF15,其特征在于:所述重组表达载体pET28b-ORF15为含有权利要求2所述的基因ORF15的表达载体,其中,所述表达载体为原核细胞表达载体pET28b(+)。

4.含有权利要求3所述重组表达载体的宿主细胞,其特征在于:所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。

5.含有权利要求2所述的基因ORF15的细胞系。

6.利用权利要求4所述宿主细胞制备裂解酶LysT15的方法:其特征在于:包括以下步骤:

(1)将重组表达载体pET28b-ORF15的大肠杆菌感受态细胞BL21培养至OD600nm为0.8-1.0,用1mM异丙基硫代半乳糖苷诱导后继续培养6h后离心,8000rpm 15min,沉淀用磷酸盐缓冲液PBS重悬,即为悬浮菌液;

(2)在温度为4℃条件下对悬浮菌液进行菌体破碎,离心收集上清,经镍柱亲和层析纯化分离,得到重组的裂解酶LysT15。

7.一种权利要求1所述沙门氏菌噬菌体裂解酶LysT15在下述方面中的应用,

1)上述裂解酶LysT15在特异性裂解沙门氏菌中的应用;

2)上述裂解酶LysT15在制备裂解沙门氏菌的生物制剂中的应用;

3)上述裂解酶LysT15在制备防止沙门氏菌对食品污染的食品添加剂中的应用。

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