[发明专利]一种双歧杆菌溶胞物及其制备方法

权利要求书

1.一种双歧杆菌溶胞物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)培养液制备：取一定重量的小米，按重量份数加入12-18倍去离子水，然后加热回流提取1.5-2.5小时，冷却至55-75℃得提取液；然后在提取液中加入酶水解10-14h，离心得上清液；取上清液按40-60g/L加入MRS培养基，混合均匀后灭菌得培养液；

(2)菌株活化：将双歧杆菌接于MRS斜面培养基上活化，25-30℃培养45-50h，再将斜面活化后的菌种按0.5-1.5％的添加量接于MRS液体试管培养基中，摇瓶200-250rpm、35-39℃培养16-24h，作为种子培养基；

(3)将菌株进行发酵，离心，破碎，即得；

所述酶为淀粉酶和/或蛋白酶；

所述淀粉酶为耐高温α-淀粉酶、β-淀粉酶、γ-淀粉酶、异淀粉酶中的一种；

所述蛋白酶为复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一种。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，淀粉酶在提取液中所占的重量百分数为0.1％～0.5％，蛋白酶在提取液中所占的重量百分数为0.05％～0.1％。

3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述双歧杆菌为两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌中的至少一种。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，发酵的具体步骤为，将步骤(2)得到的种子培养基以4-6％的添加量加入步骤(1)制得的培养液中，使发酵初始菌浓度为10⁵-10⁸CFU/ml，同时调节培养液的pH为4.5-7，温度35-39℃，搅拌转速50-150rpm，发酵时间22-26h，得发酵液。

5.一种由权利要求1-4任一项所述的制备方法得到的溶胞物。

6.一种护肤组合物，其特征在于，按重量百分比计，包括5-15％权利要求5所述的溶胞物。