[发明专利]一种尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法有效
| 申请号: | 202010020380.0 | 申请日: | 2020-01-09 |
| 公开(公告)号: | CN111197029B | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
| 发明(设计)人: | 曹东林;钟丽梅 | 申请(专利权)人: | 广东省第二人民医院(广东省卫生应急医院) |
| 主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
| 代理公司: | 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 | 代理人: | 徐东峰 |
| 地址: | 510317 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 尿酸 诱导 产生 抑制 细胞 方法 | ||
1.一种尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)从样本中分离单核细胞;
(2)用含GM-CSF的完全培养基对步骤(1)获得的单核细胞进行体外培养;
(3)向步骤(2)所述培养体系中加入尿酸钠继续进行体外培养,获得髓系抑制性细胞;所述尿酸钠在培养体系中的浓度为200-600μg/ml。
2.根据权利要求1所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的样本为小鼠骨髓或人外周血样本。
3.根据权利要求1-2任一项所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述步骤(2)中的完全培养基由RPMI 1640和包含以下原料的组分制备而成:
胎牛血清 10v/v%;
β-巯基乙醇 50uM。
4.根据权利要求3所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述完全培养基中还含有抗生素。
5.根据权利要求1-2任一项所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述步骤(2)中GM-CSF在完全培养基中的浓度为20-30ng/ml。
6.根据权利要求1-2任一项所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述步骤(2)中单核细胞在完全培养基中的密度为0.8-1.0×106cells/ml。
7.根据权利要求1-2任一项所述的尿酸钠诱导产生髓系抑制性细胞的方法,其特征在于,所述步骤(3)中加入尿酸钠后继续体外培养5-6天,培养至第3天时更换一次培养液。
8.尿酸钠在制备体外诱导产生髓系抑制性细胞的试剂中的用途,其特征在于,所述尿酸钠在培养体系中的浓度为200-600μg/ml。
9.一种体外诱导产生髓系抑制性细胞的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含尿酸钠和GM-CSF;所述尿酸钠在培养体系中的浓度为200-600μg/ml。
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