[发明专利]核桃青皮中一种三萜化合物的制备方法和应用

权利要求书

1.一种从核桃青皮中分离得到的达玛烷型三萜化合物衍生物，命名为青龙衣三萜大环缩酮I，其特征在于，其化学结构式如下：

。

2.权利要求1所述达玛烷型三萜化合物衍生物青龙衣三萜大环缩酮I的制备方法，其特征在于，以核桃青皮为原料，依次通过95%乙醇提取、大孔树脂富集纯化、二氯甲烷萃取、正相硅胶柱色谱和葡聚糖凝胶柱色谱分离、重结晶制备得到。

3.权利要求2所述达玛烷型三萜化合物衍生物青龙衣三萜大环缩酮I的制备方法，其特征在于，通过以下具体步骤制备：

（1）醇提：将核桃青皮干品，适当粉碎，然后加入95%乙醇回流提取1～3次，药材重量与乙醇体积比为1:8～1:12，减压回收提取液得到乙醇粗提物浸膏；

（2）大孔树脂富集纯化：将步骤（1）所得乙醇粗提物浸膏用水分散至相对密度为1.20±0.05g/mL的溶液，经AB-8或D101型大孔树脂柱色谱富集纯化，分别以30%乙醇、90%乙醇依次洗脱，收集90%乙醇洗脱液，减压回收溶剂得90%乙醇洗脱部位的浸膏；

（3）二氯甲烷萃取：将步骤（2）所得90%乙醇洗脱部位的浸膏悬浮于水中得混悬液，混悬液体积是原有90%乙醇浸膏的5倍，再用与混悬液等体积的二氯甲烷萃取5～8次，合并萃取液，回收溶剂得到二氯甲烷萃取物；

（4）正相硅胶柱色谱分离：取步骤（3）所得二氯甲烷萃取物进行正相硅胶柱色谱分离，所述硅胶柱内的拌样硅胶为80～100目，拌样硅胶与二氯甲烷萃取物质量比为2:1～5:1；所述硅胶柱内的装柱硅胶为200～300目的柱层析硅胶，装柱硅胶与二氯甲烷萃取物质量比为10:1～15:1，依次采用体积比为50:1、20:1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，每一个比例洗脱5个柱体积，其中体积比为20:1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂洗脱部分减压回收溶剂得到分离产物；

（5）葡聚糖凝胶柱色谱分离：取经步骤（4）分离后的产物，通过葡聚糖凝胶柱，以甲醇和水体积比2:1的混合溶剂进行洗脱，洗脱5个柱体积，弃去前2个柱体积洗脱液，收集后面3个柱体积洗脱液，回收溶剂，得粗品；

（6）重结晶处理：将步骤（5）所得粗品采用二氯甲烷重结晶两次，即可得到该化合物纯品。

4.权利要求1所述的达玛烷型三萜化合物衍生物青龙衣三萜大环缩酮I在制备抗肿瘤药物方面的应用，其特征在于，所述的肿瘤为胃癌、肝癌或结肠癌。