[发明专利]一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，提供一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒及检测方法，用于提供一种肤质检测的新手段。本发明提供的一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒，包括：痤疮丙酸杆菌特异引物及其探针、乳酸菌属通用引物及其探针、内参引物、阳性对照样品模板、阴性对照样品模板、用于PCR的反应试剂；所述痤疮丙酸杆菌特异引物及其探针为：上游引物Pro‑F 5′‑CCACAACAACCTAGAGTC‑3′；下游引物Pro‑R 5′‑GAACGGAATTAAGTCTGTAAG‑3′；探针：FAM‑ATAACCACACGCCTACCACGAT‑BHQ1。检测方法简单、耗时短。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒。

背景技术

传统的肤质检测是利用电子拍照技术，或利用皮肤探测器检测，获取用户的皮肤图片信息或生物电阻抗数据来分析皮肤的水分状况。利用基因基因测序技术能做到检测病原菌，例如检测到马拉色菌（糠疹分枝杆菌）能够作为花斑癣的指示病原菌。但是皮肤微生物群做为皮肤水分油脂状况的生物标志物无前人研究。目前常用的皮肤上微生物检测方法是培养基菌落培养技术，该技术原理基于细胞培养的方法例如形态学观察。

微生物形成菌落需要适宜的温度、湿度、培养条件、需要依赖培养，形成是肉眼可见菌落周期长、鉴定准确度低；其次有些微生物培养环境苛刻，因此难以培养鉴定。同时病原菌基因测序技术检测成本高。

发明内容

本发明解决的技术问题为提供一种肤质检测的新手段，提供一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒。

为了解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一种基于微生物PCR技术检测肤质的试剂盒，包括：痤疮丙酸杆菌特异引物及其探针、乳酸菌属通用引物及其探针、内参引物、阳性对照样品模板、阴性对照样品模板、用于PCR的反应试剂；

所述痤疮丙酸杆菌特异引物及其探针为：

上游引物Pro-F 5′-CCACAACAACCTAGAGTC-3′

下游引物Pro-R 5′-GAACGGAATTAAGTCTGTAAG-3′

探针：FAM-ATAACCACACGCCTACCACGAT-BHQ1。

采用该特异引物来检测是否存在痤疮丙酸杆菌。

特异引物检测痤疮丙酸杆菌的特异性、灵敏性和重复性高。

优选地，所述乳酸菌属通用引物及其探针为：

上游引物Lab-F 5′-GGGAATCTTCCACAATGGAC-3′

下游引物Lab-R 5′-CATGGAGTTCCACTCTCCTCT-3′

探针：VIC-ATAACCACACGCCTACCACGAT-BHQ1。采用该乳酸菌属通用引物可以快速地检测出是否存在乳酸菌。

优选地，所述内参引物为GAPDH基因引物，所述GAPDH基因引物为：

上游引物GAPDH-F 5′-ACAGCCTCAAGATCATCAGCA-3′

下游引物GAPDH-R 5′-ATGAGTCCTTCCACGATACCA-3′

探针：CY5-GTGCTAAGCAGTTGGTGGTGCAGGA-BHQ2。

优选地，所述阳性对照模板为纯化过的标准痤疮丙酸杆菌菌株基因组DNA以及纯化过的标准乳酸菌菌株基因组DNA；

所述阴性对照模板为去离子水。