[发明专利]一株Sphingobacterium hotanense在防治寄生线虫病上的应用

说明书

本发明公开了一株Sphingobacterium hotanense在防治寄生线虫病上的应用。本发明提供的Sphingobacterium hotanense AMCC 101218，保藏编号为CGMCC No.19217；该菌可有效地防治黄瓜根结线虫病，其卵囊数、根结数、虫口密度相比于空白对照分别下降了71.28％、75.86％和63.80％；AMCC101218基因组大小为4490254bp，GC含量为41.21％。

技术领域

本发明涉及一株Sphingobacterium hotanense及其在防治植物寄生线虫病上的应用，属于微生物技术领域。

背景技术

随着设施栽培的推广，作物种类单一，种植地域化，农业复种指数较高等问题，造成了农业可持续发展一大难题----连作障碍。连作障碍是指在正常栽培管理措施下，同一地块连续种植相同作物，造成产量降低、品质变劣、病虫害发生频繁等现象。连作障碍通常会引起土壤理化性状变差、酚类化合物大量积累、土壤养分分布不均、土壤次生盐渍化、土壤酶活性改变等问题，除此之外，连作障碍还会引起土壤微生物种群发生改变，病原物大量积累，加重作物的病虫害，植物寄生线虫病是其中危害较大的病害。

应用化学农药是防治根结线虫病的主要手段，但是目前所用的有机硫类、卤代烃类、硫代异硫氰酸甲酯类和有机磷类杀线剂，毒性较高且对线虫的毒杀作用非特异，会对其他非靶标生物造成危害，这些高毒化学农药在使用过程中也极易威胁人畜的安全。随着人们环保意识的增强，部分高毒农药已被明令禁止使用。

近年来，利用生防细菌及其代谢产物来防治植物病害成为国内外在生物防治研究中的一个热点。但是相比于生防真菌，生防细菌的菌种选育、生产工艺和工业化生产研究则相对滞后，导致以生防细菌为代表的生防制剂应用十分有限。

鞘氨醇杆菌是一类广泛存在于自然界中的不产生芽孢的革兰氏阴性细菌，其中多种鞘氨醇杆菌被发现具有降解特性，包括石油、五氯酚等，然而，关于鞘氨醇杆菌防治植物寄生线虫病却鲜有报道。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一株Sphingobacterium hotanense可应用于黄瓜根结线虫病的生物防治。

一株Sphingobacterium hotanense AMCC 101218，简称AMCC 101218菌株，从根际土壤中分离得到，已于2019年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.19217。

AMCC101218菌株的主要生物学特性为：菌落形状呈圆形，边缘不整齐，不透明，菌落颜色为黄色，革兰氏染色为阴性。

所述菌株Sphingobacterium hotanense AMCC 101218，从根际土壤中分离得到，简称AMCC 101218。

一种AMCC 101218微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)菌种活化：将超低温冻存的Sphingobacterium hotanense划线接种于LB固体培养基平板上，于34-37℃培养21-26h。

(2)种子液制备：将活化好的AMCC101218接种于装有LB液体培养基中，于34-37℃，170-220rpm培养16-22h。

(3)种子液扩大培养：将步骤(2)中的种子液以5-8％的接种量接种到种子液扩大培养基中，所述的扩大培养基为LB液体培养基，于34-37℃，170-220rpm培养8-12h。

(4)发酵培养：将步骤(3)中扩大培养的种子液以5-8％的接种量接种到BPY发酵培养基，34-37℃培养40-48h，得到AMCC101218液体菌剂；