[发明专利]一株Sphingobacterium hotanense在防治寄生线虫病上的应用

权利要求书

1.一株Sphingobacterium hotanense AMCC 101218，于2019年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 19217。

2.权利要求1所述Sphingobacterium hotanense AMCC 101218微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

（1）菌种活化：将超低温冻存的Sphingobacterium hotanense划线接种于LB固体培养基平板上，于34-37℃培养21-26h；

（2）种子液制备：将活化好的AMCC 101218接种于装有LB液体培养基中，于34-37℃，170-220rpm培养16-22h；

（3）种子液扩大培养：将步骤（2）中的种子液以5-8％的接种量接种到种子液扩大培养基中，所述的扩大培养基为LB液体培养基，于34-37℃，170-220rpm培养8-12h；

（4）发酵培养：将步骤（3）中扩大培养的种子液以5-8％的接种量接种到BPY发酵培养基，34-37℃培养40-48h，得到AMCC101218液体菌剂；

所述BPY发酵培养基，每升包括如下组分：牛肉膏 4.5-5.5g，蛋白胨 9.0-11.0g，酵母膏4.5-5.5g，葡萄糖 4-6g，NaCl 4.5-5.5 g，余量水， pH6.5- 7.3。

3.如权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）接种后LB固体培养基平板，于37℃培养24h。

4.如权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）接种后的LB液体培养基于37℃，180rpm培养18h。

5.如权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）接种后的种子液扩大培养基，于37℃，200rpm，培养8h。

6.如权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中发酵培养于37℃，200rpm培养48h。

7.如权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中的BPY发酵培养基，每升包括如下组分：牛肉膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，酵母膏 5.0g，葡萄糖 5.0g，NaCl5.0 g，余量水， pH 7.0。

8.一种液体微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的Sphingobacterium hotanense AMCC 101218菌株，菌体浓度为1.0×10⁷-2.5×10⁸CFU/mL。

9.权利要求1所述Sphingobacterium hotanenseAMCC101218菌株在防治由一种或多种线虫引起的植物病害中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述线虫为：南方根结线虫、象耳豆根结线虫、松材线虫之一或两种以上的组合。

11.权利要求8所述Sphingobacterium hotanense AMCC101218菌剂在防治由一种或多种线虫引起的植物病害中的应用。

12.如权利要求11所述应用，其特征在于，所述线虫为：南方根结线虫、象耳豆根结线虫、松材线虫之一或两种以上的组合。