[发明专利]作为阿尔茨海默病的诊断和预后中的标志物的p53肽

权利要求书

1.一种p53肽，所述p53肽由式(I)P1:TEEENLR(SEQ ID N.1)组成。

2.一种p53肽，所述p53肽具有式(II)P2:TEEENLRK[GG]K(SEQ ID N.2)，其中[GG]是从P2序列的第一个K氨基酸分支的部分。

3.根据权利要求1所述的p53肽，所述p53肽具有的氨基酸序列与式(I)的序列具有至少80％-90％的同一性，优选地与式(I)的序列具有至少90％-95％的同一性，更优选地与式(I)的序列具有至少96％-99％的同一性。

4.一种p53肽，所述p53肽具有式(III)P3:KKPLDGEYFTLQIR(SEQ ID N.3)。

5.一种p53肽，所述p53肽具有式(V)P5:GEPHHELPPGSTKRALPNNTSSSPQPK(SEQ ID N.5)。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的p53肽作为用于阿尔茨海默病的诊断和/或预后的体外生物标志物的用途。

7.根据权利要求4或5所述的p53肽作为用于阿尔茨海默病的诊断的体外生物标志物的用途。

8.一种用于阿尔茨海默病的诊断和/或预后的体外或离体方法，所述方法包括以下步骤：

a)确定生物样品中根据权利要求1-5中任一项所述的p53肽的存在，和

b)通过比较所述肽与给定对照来定量所述肽。

9.根据权利要求8所述的方法，所述方法还包括步骤c)将所述p53肽的量与处于阿尔茨海默病不同阶段的患者中阿尔茨海默病的诊断相关联。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述生物样品是血液、血浆、血清、唾液、尿液、神经元细胞、血细胞或其他类型的细胞。

11.根据权利要求8-10中任一项所述的方法，其中步骤a)通过用与p53肽结合的单克隆抗体免疫沉淀所述p53肽来进行。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述单克隆抗体是抗体2D3A8。

13.根据权利要求8-12中任一项所述的方法，其中步骤b)通过质谱分析进行，优选地通过HPLC-质谱进行。

14.根据权利要求8-13中任一项所述的方法，其中步骤b)通过使用标记的肽作为内部对照进行。

15.根据权利要求8-14中任一项所述的方法，所述方法包括以下步骤：

a)通过以下(i)、(ii)、(iii)、(iv)来确定生物样品中所述p53肽的存在：

(i)提供生物样品；

(ii)通过与p53肽结合的抗体进行蛋白免疫沉淀；

(iii)通过胰蛋白酶进行蛋白片段化；

(iv)进行所述肽的强阳离子交换色谱法；

和

b)通过以下(v)经由比较所述p53肽与给定内部对照来定量所述p53肽：

(v)进行选择性反应监测分析以通过比较所述p53肽与给定对照来鉴定和定量所述p53肽。

16.根据权利要求15所述的方法，其中在进行步骤a)(ii)之前，通过HPLC或色谱柱对步骤a)(i)的生物样品进行蛋白血浆消耗。

17.根据权利要求8-16中任一项所述的方法，其中所述方法用于无症状个体和罹患MCI的人中阿尔茨海默病的诊断。