[发明专利]蛋白酶变体及其用途

权利要求书

1.一种重组丝氨酸蛋白酶，其包含与SEQ ID NO:2中限定的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列，并且包含在根据SEQ ID NO:2的编号中的在位置103的氨基酸D和/或在位置105的氨基酸E。

2.根据权利要求1所述的重组丝氨酸蛋白酶，其中，在根据SEQ ID NO:2的编号中，所述多肽具有至少一个选自Q103D和S105E的氨基酸取代。

3.根据权利要求1或2所述的重组丝氨酸蛋白酶，其中，其氨基酸序列对应于SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8中描述的氨基酸序列之一。

4.一种分离的核酸分子，其包含编码选自以下组的丝氨酸蛋白酶的多核苷酸序列：

(a)编码具有丝氨酸蛋白酶活性的多肽并包含如SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ IDNO:8中描述的氨基酸序列的核酸分子；和

(b)包含如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7中描述的核苷酸序列的编码序列的核酸分子。

5.一种重组表达载体，其包含根据权利要求4所述的分离核酸，所述核酸与能够指引所述丝氨酸蛋白酶在合适宿主中表达的调控序列可操作地连接。

6.一种宿主细胞，其包含权利要求5所述的重组表达载体。

7.根据权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主为微生物宿主。

8.根据权利要求6或7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主为丝状真菌。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主属于木霉属、曲霉属、镰孢菌属、腐质霉属、金孢子菌属、脉孢菌属、根霉属、青霉属、毁丝霉属和被孢霉属。

10.根据权利要求9所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主是里氏木霉。

11.一种生产蛋白酶的方法，该方法包括步骤：将氨基酸取代Q103D和/或S105E引入序列中，所述序列包含与SEQ ID NO:2中限定的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列。

12.根据权利要求11所述的生产蛋白酶的方法，所述方法还包括步骤：培养权利要求6-10中任一项所述的宿主细胞并回收酶。

13.一种酶制剂，其包含权利要求1-3中任一项所述的重组丝氨酸蛋白酶。

14.根据权利要求13所述的酶制剂，其特征在于，所述制剂包括选自蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、角质酶、果胶酶、聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶、果胶分解酶、酯酶、植酸酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、黄原酶、木葡聚糖酶、DNA酶和氧化酶的有或没有介质的其他酶。

15.根据权利要求13或14所述的酶制剂，其特征在于，所述制剂包含一种或更多种选自稳定剂、缓冲剂、表面活性剂、助洗剂、漂白剂、介质、抗腐蚀剂、抗再沉积剂、腐蚀剂、研磨剂、光增白剂、染料、香料、颜料和防腐剂的添加剂。

16.根据权利要求13-15中任一项所述的酶制剂，其特征在于，所述酶制剂为液体组合物或固体组合物的形式，例如为溶液、分散体、糊剂、粉剂、粒剂、颗粒剂、包衣颗粒剂、片剂、糕剂、晶体、晶体浆液、凝胶或丸剂。

17.权利要求1-5中任一项所述的重组丝氨酸蛋白酶或权利要求13-16中任一项所述的酶制剂在用于去污剂、用于处理纤维、用于处理蛋白质材料、用于处理食品或饲料或用于涉及蛋白质材料的改性、降解或去除的应用中的用途。