[发明专利]同时解析多种抗体同种型的高特异性和灵敏度免疫吸附诊断测定

权利要求书

1.一种表征个体对病原体产生的免疫应答的方法，所述方法包含：

从所述个体中采集至少一个含有抗体的样本；

使来自所述个体的所述至少一个含有抗体的样本与诊断性病原体接触；

使所述诊断性病原体与一种或更多种同种型特异性或糖基化特异性试剂接触，其中所述试剂与可检测部分可操作地连接；以及

分析所述诊断性病原体中是否存在结合的同种型特异性或糖基化特异性试剂，从而确定病原体特异性抗体的存在和类型，其中所述存在和类型指示病原体感染和免疫应答。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述诊断性病原体是完整病原体，其经基因修饰以表达荧光团。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述荧光团是荧光蛋白。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述荧光蛋白选自由绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)及其类似物组成的群组。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述诊断性病原体是活病原体或已固定的病原体。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述诊断性病原体是临床分离株或环境分离株。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述诊断性病原体来自细胞系或细胞培养物。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述诊断性病原体经进一步基因修饰，以消除在病原体中高度保守的蛋白和其他表位的表达。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述表位存在于细胞表面蛋白上。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述细胞表面蛋白是鞭毛蛋白。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述鞭毛蛋白是疏螺旋体的fliH和fliI蛋白中的其中一种或两种。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述病原体是细胞病原体。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述病原体选自细菌、真菌和原生动物。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述细菌是螺旋体。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述螺旋体是疏螺旋体属。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述传染性病原体是蜱传病原体。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述蜱传病原体是伯氏疏螺旋体。

18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述同种型特异性试剂是识别IgM、IgG1、IgG2、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG4、IgA、IgA1、IgA2、IgE、IgD或Ig特异性糖基化位点(例如IgA1-G2S1或IgG4-G0F)中的其中一项的抗体。

19.根据权利要求18所述的方法，其中2种或更多种独特标记的同种型/亚型/糖基化特异性试剂的混合物与所述样本接触。

20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中通过选自流式细胞术、大量细胞计数法、序列条形码编码抗体的测序或PCR以及高维/多参数显微镜检查的方法进行分析。