[发明专利]嵌合黄病毒丽沙病毒疫苗

权利要求书

1.一种多核苷酸，其包含活的感染性减毒黄病毒的序列，其中编码丽沙病毒G蛋白的至少一部分的核苷酸序列位于所述黄病毒的E和NS1基因之间的基因间区域处，使得嵌合病毒得以表达，其特征在于，在所述黄病毒的E蛋白的C末端和所述黄病毒的NS1蛋白的信号肽的N末端的编码序列以下列次序包含：

-黄病毒NS1蛋白的另一信号肽，

-丽沙病毒G蛋白，所述丽沙病毒G蛋白包含功能缺陷的信号肽或缺少功能性信号肽，包含IIb表位，包含C末端TM膜序列和包含C末端胞质序列，以及

-黄病毒E蛋白的TM2结构域。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述活的感染性减毒黄病毒的序列是黄热病病毒，典型地是YF17D株。

3.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述活的感染性减毒黄病毒是嵌合病毒。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的多核苷酸，其中所述丽沙病毒是狂犬病病毒。

5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其中所述狂犬病病毒G蛋白是ERA株的G蛋白。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的多核苷酸，其中所述G蛋白的核苷酸序列为在哺乳动物细胞中表达提高进行了密码子优化。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的多核苷酸，其中所述NS1蛋白的信号肽包含序列DQGCAINFG[SEQ ID NO:6]或由序列DQGCAINFG[SEQ ID NO:6]组成。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的多核苷酸，其中所述IIb表位具有序列GCTNLSGFS[SEQ ID NO:15]。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的多核苷酸，其中所述黄病毒E蛋白的TM2结构域来自西尼罗病毒。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的多核苷酸，其中黄病毒E蛋白的TM2结构域具有序列RSIAMTFLAVGGVLLFLSVNVHA[SEQ ID NO 13]。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的多核苷酸，其中Rab G的功能缺陷的信号肽包含F14S突变。

12.根据权利要求1-10中任一项所述的多核苷酸，其中所述Rab G缺少氨基酸1-19的N末端信号序列MVPQALLFVPLLVFPLCFG[SEQ ID NO 18]。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的序列在黄病毒E基因、NS1信号肽和Rab G蛋白的连接处包含序列LGVGA DQGCAINFG KFPIY[SEQ ID NO:21]。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的序列在WNV TM2结构域、NS1信号序列和YFV的连接处包含序列VNVHA DQGCAINFG KRELK[SEQ ID NO:22]。

15.根据权利要求1-15中任一项所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的编码序列包含SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2的序列具有95％或99％序列同一性的序列。

16.根据权利要求1-16中任一项所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:1的序列或与SEQ ID NO:1的序列具有95％或99％序列同一性的序列。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的多核苷酸，所述多核苷酸是细菌人工染色体。