[发明专利]碱性磷酸酶组合物以及去磷酸化核酸和标记化核酸的制造方法

权利要求书

1.含有碱性磷酸酶、由序列号1所记载的氨基酸序列组成的第1肽片段、由序列号2所记载的氨基酸序列组成的第2肽片段、由序列号3所记载的氨基酸序列组成的第3肽片段、由序列号4所记载的氨基酸序列组成的第4肽片段、由序列号5所记载的氨基酸序列组成的第5肽片段、和由序列号6所记载的氨基酸序列组成的第6肽片段的组合物，

所述组合物中，所述第1～第6肽片段的含量相对于所述碱性磷酸酶的含量的比率分别满足下述式(1)～(6)：

(X₁/Y)×100≤0.6000···(1)

(X₂/Y)×100≤0.1800···(2)

(X₃/Y)×100≤0.2000···(3)

(X₄/Y)×100≤0.8000···(4)

(X₅/Y)×100≤1.6000···(5)

(X₆/Y)×100≤0.3500···(6)

式中，X₁～X₆分别表示由提取离子色谱利用自动积分法计算出的、所述第1～第6肽片段的峰面积值，所述提取离子色谱是通过所述组合物的LC-MS/MS分析而得的，

Y表示由色谱利用自动积分法计算出的、所述碱性磷酸酶的峰面积值，所述色谱是通过所述组合物的LC-UV分析而得的。

2.根据权利要求1所述的组合物，

所述组合物进一步含有由序列号7所记载的氨基酸序列组成的第7肽片段，

相对于所述碱性磷酸酶的含量的所述第7肽片段的含量满足下述式(7)：

(X₇/Y)×100≤1.0000···(7)

式中，X₇表示由提取离子色谱利用自动积分法计算出的、所述第7肽片段的峰面积值，所述提取离子色谱是通过所述组合物的LC-MS/MS分析而得的，

Y与上述含义相同。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，

所述组合物进一步含有由序列号8所记载的氨基酸序列组成的第8肽片段，

相对于所述碱性磷酸酶的含量的所述第8肽片段的含量满足下述式(8)：

(X₈/Y)×100≤1.0000···(8)

式中，X₈表示由提取离子色谱利用自动积分法计算出的、所述第8肽片段的峰面积值，所述提取离子色谱是通过所述组合物的LC-MS/MS分析而得的，

Y与上述含义相同。

4.根据权利要求1～3的任一项所述的组合物，

所述组合物进一步含有由序列号9所记载的氨基酸序列组成的第9肽片段，

相对于所述碱性磷酸酶的含量的所述第9肽片段的含量满足下述式(9)：

(X₉/Y)×100≤2.3000···(9)

式中，X₉表示由提取离子色谱利用自动积分法计算出的、所述第9肽片段的峰面积值，所述提取离子色谱是通过所述组合物的LC-MS/MS分析而得的，

Y与上述含义相同。

5.根据权利要求1～4的任一项所述的组合物，所述组合物具有2000U/mg以上的碱性磷酸酶比活性。

6.根据权利要求1～5的任一项所述的组合物，

所述碱性磷酸酶选自下述(a)和(b)：

(a)具有由序列号10所记载的氨基酸序列组成的蛋白质分子的碱性磷酸酶；和

(b)具有由与序列号10所记载的氨基酸序列有70％以上的序列同一性、并且包含序列号10所记载的氨基酸序列的78～90位、177～187位、469～477位、516～528位和534～551位的氨基酸序列组成的蛋白质分子的碱性磷酸酶。

7.根据权利要求6所述的组合物，所述(b)的碱性磷酸酶所具有的蛋白质分子的氨基酸序列进一步包含选自序列号10所记载的氨基酸序列的91～109位、93～105位和529～531位中的1种或2种以上。