[发明专利]肝-胆-胰组织和其制备方法

权利要求书

1.一种肝-胆-胰类器官(“HBPO”或“HBP类器官”)，其中所述HBPO具有两种或更多种选自以下的功能：肝组织功能、胆组织功能、外分泌胰功能和内分泌胰组织功能。

2.根据权利要求1所述的HBPO，其中所述多器官三维类器官组合物包含前部区域、后部区域和边界区域，其中所述边界区域表达胰和十二指肠同源盒1(PDX1)和造血表达的同源盒蛋白(HHEX)。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的HBPO，其中所述HBPO包含胆管组织和胰组织。

4.根据权利要求3所述的HBPO，其中所述胆管组织和所述胰组织连接。

5.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述HBPO包含肝脏细胞、胰腺细胞、胆管细胞和肠细胞。

6.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述类器官包含内皮细胞。

7.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述类器官包含间充质细胞。

8.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述HBPO包含内胚层和中胚层。

9.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述HBPO具有支化结构。

10.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述类器官表达功能外分泌标志物，优选地淀粉酶，和内分泌标志物，优选地胰岛素。

11.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述类器官响应于激素，优选地响应于胆囊收缩素(CCK)分泌淀粉酶。

12.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述组合物基本上不含粘膜下腺、过渡区域、血管系统、免疫细胞或粘膜下层中的一种或多种。

13.根据前述权利要求中任一项所述的HBPO，其中所述HBPO通过扩增一个或多个前体细胞获得。

14.一种制备肝-胆-胰类器官(“HBPO”或“HBP类器官”)的方法，其包含

使第一定形内胚层与Wnt信号传导途径激活剂、FGF信号传导途径激活剂和BMP信号传导途径抑制剂接触以形成前部肠道球体；

使第二定形内胚层使Wnt信号传导途径激活剂和FGF信号传导途径激活剂接触以形成后部肠道球体；

使所述前部肠道球体与所述后部肠道球体接触，直到所述前部肠道球体和所述后部肠道球体融合以形成具有前肠道-中肠道边界的边界类器官；和

培养具有所述前肠道-中肠道边界的所述边界类器官以形成所述HBPO；

其中所述HBPO包含胆组织和胰组织。

15.根据权利要求16所述的方法，其中所述HBPO包含肝脏组织、胰组织、胆管组织和肠组织。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述前部肠道球体包含表达SRY-盒2(SOX2)的细胞。

17.根据权利要求14到16中任一项所述的方法，其中所述前部肠道球体基本上不含胰和十二指肠同源盒1(PDX1)表达细胞。

18.根据权利要求14到17中任一项所述的方法，其中所述后部肠道球体包含表达胰和十二指肠同源盒1(PDX1)的细胞。

19.根据权利要求14到18中任一项所述的方法，其中所述后部肠道球体包含表达尾侧型同源盒2(CDX2)的细胞。