[发明专利]用于LC-MS/MS的简化的生物样品处理

说明书

公开了使用液相色谱/串联质谱(LC‑MS/MS)用于分析从生物样品中分离的内源性生物标志物的方法和系统。在某些实施方案中，样品包含干燥的体液，例如干燥的血浆。

相关申请

本申请要求2018年6月1日提交的美国临时专利申请号62/679,133、2018年6月1日提交的美国临时专利申请号62/679,286和2018年6月4日提交的美国临时专利申请号62/680,256的优先权。美国临时专利申请号62/679,133、62/679,286和62/680,256的公开内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本文公开的主题涉及用于LC-MS/MS的简化的生物样品处理的方法和系统。在某些情况下，所述方法和系统可以用于检测生物分子包括激素、肽、蛋白质、核酸和脂质。

背景技术

作为确定个体健康状况的一部分，经常需要测定许多不同类型的生物标志物(即分析物)。尽管可以通过在医疗机构中进行静脉切开术来获取血浆和/或血液样品，但这对患者来说可能是不方便的。而且，随着改进的测定技术所提供的增加的灵敏度，通常仅需要几滴而不是整管血液。除了标准的血清和血浆样品之外，利用在可以获取少量的血液和/或血浆的采血装置上采集的样品将很有帮助。

还需要将这种简化的样品采集方法应用于高精度定量测定，例如生物标志物的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定。诸如LC-MS/MS的技术(其是非常灵敏且精确的)在标准化和归一化方面需要独特的考虑。

发明内容

在一些实施方案中，本发明提供了用于简化的生物样品处理以用于此类生物样品的LC-MS/MS测定的方法和系统。所述方法可以以多种方式实施。

在一个实施方案中，本公开内容提供了一种用于确定生物样品中至少一种感兴趣的生物标志物的存在或量的方法，所述方法包括：提供据信包含至少一种感兴趣的生物标志物的生物样品，其中所述生物样品包含干燥的血浆；从干燥的血浆样品中提取所述至少一种感兴趣的生物标志物和至少一种标准化标志物到液体溶液中；通过质谱测量所述液体溶液中的所述至少一种感兴趣的生物标志物；通过适当的分析技术测量所述液体溶液中的至少一种感兴趣的标准化标志物；和使用针对所述至少一种感兴趣的生物标志物和至少一种感兴趣的标准化标志物的测量结果的比率来确定所述生物样品中所述至少一种感兴趣的生物标志物的存在或量。

还公开了用于执行本发明的方法的系统。例如，公开了一种用于确定生物样品中感兴趣的生物标志物的存在和/或量的系统，所述系统包括：用于提供包含干燥血液和/或血浆的测试样品的装置；和用于通过质谱分析样品以确定感兴趣的生物标志物在生物样品中的存在或量的工作站。在一些实施方案中，所述系统可以包括：用于提供据信包含至少一种感兴趣的生物标志物的生物样品的工作站，其中所述生物样品包含干燥的血浆；用于从所述干燥的血浆样品中提取所述至少一种感兴趣的生物标志物和至少一种标准化标志物到液体溶液中的工作站；用于通过质谱测量所述液体溶液中的所述至少一种感兴趣的生物标志物的工作站；用于通过适当的分析技术测量所述液体溶液中的至少一种感兴趣的标准化标志物的工作站；和用于使用针对所述至少一种感兴趣的生物标志物和至少一种感兴趣的标准化标志物的测量结果的比率来确定所述生物样品中所述至少一种感兴趣的生物标志物的存在或量的工作站。所述系统可以包括用于通过本文公开的任何方法测量标准化标志物的工作站。在一些实施方案中，对这些工作站进行了改变，或者可能存在其他工作站。例如，在某些情况下，可能存在用于添加内标的工作站和/或用于部分纯化从血浆中提取的生物标志物的工作站(例如，用于液体萃取、稀释、蛋白质沉淀、LC和/或HPLC的工作站)。此外，在一些实施方案中，可以组合一些工作站。例如，在一个实施方案中，用于提取生物标志物的工作站可以包括用于添加内标的装置。

在系统的各种实施方案中，感兴趣的生物标志物可包括肽或蛋白质(例如酶和其他蛋白质)、激素、细胞因子、核酸、脂质或蛋白质。或者，可以测量其他生物标志物。此外，在其中感兴趣的生物标志物是蛋白质的某些情况下，可以对样品进行蛋白水解消化，以从蛋白质生成肽。或者，可以测量其他生物标志物。