[发明专利]用于治疗胆管缺乏相关病况的方法和组合物

说明书

本公开涉及可用于降低CTNNB1表达(尤其是在肝细胞中)用于治疗胆管缺乏相关病况的寡核苷酸、组合物和方法。公开的用于降低CTNNB1表达的寡核苷酸可以是双链或单链的，并且可以被修饰以改善特性，诸如更强的对核酸酶的抗性和更低的免疫原性。公开的用于降低CTNNB1表达的寡核苷酸也可以包括靶向配体以靶向特定细胞或器官，诸如肝脏的肝细胞。

相关申请

本申请根据35 U.S.C. § 119(e)要求在2018年3月2日提交且题为“METHODS ANDCOMPOSITIONS FOR TREATING BILE DUCT PAUCITY-ASSOCIATED CONDITIONS”的美国临时申请号62/637973的益处，所述申请的完整内容通过引用并入本文。

发明领域

本申请涉及寡核苷酸及其用途，尤其是涉及与胆管缺乏(bile duct paucity)相关的病况的治疗的用途。

序列表的引用

本申请与电子格式的序列表一起提交。该序列表作为在2019年2月15日创建的题为D0800.70013WO00 – SEQ.txt的文件(其大小为5.45 KB)提供。序列表的电子格式的信息通过引用以其整体并入本文。

发明背景

影响胆汁酸产生、分泌和/或摄取的病症可具有重要的生理意义。例如，胆汁淤积是常见的肝脏疾病，尤其是在新生儿中，其导致胆汁流量和排泄减少，以及结合性血胆红素过多症延长。类似地，肝内胆管的缺乏与各种病症和异常有关，包括家族性综合征，称为Alagille综合征(AGS)，其牵涉慢性胆汁淤积、心脏异常、肌肉骨骼异常、眼部异常和畸形的脸。在许多个体，特别是患有AGS的个体中，胆管缺乏与快速进行性肝病有关。胆道闭锁(BA)是婴儿期肝内和肝外胆管的另一种进行性纤维闭塞性病症。缺乏用于治疗此类患者的合适方法，包括用于改善胆管缺乏的方法。

发明简述

本公开的方面涉及用于治疗受试者的胆管缺乏和相关病况的方法。在一些实施方案中，本公开涉及以下发现：选择性抑制受试者中的CTNNB1表达可用于增加受试者的胆管容量(例如，用于刺激新的胆管形成)。在一些实施方案中，本文提供的方法利用RNAi寡核苷酸来降低受试者的β-连环蛋白活性，从而增加受试者的胆管容量(例如，促进胆管的再生)。通过本文提供的方法产生的胆管容量增加的结果是胆汁流量的改善(例如胆汁酸摄取增加)和循环胆汁酸的相应减少(参见例如实施例4，其显示了施用CTNNB1 RNAi寡核苷酸降低了胆管损伤的动物模型中的胆汁酸水平)。在一些实施方案中，β-连环蛋白活性的降低减少了肝细胞中的胆汁酸合成，这可以预防受试者中由于胆管缺乏引起的胆汁酸诱导的急性毒性。因此，在一些实施方案中，本文提供的方法可用于通过新的胆管的再生和胆汁酸合成的减少来治疗胆管缺乏相关病况，例如Alagille综合征和胆道闭锁。

本公开的一个方面提供了用于降低CTNNB1的表达的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含长度为15至30个核苷酸的反义链。在一些实施方案中，互补的区域长度为至少15个、至少16个、至少17个、至少18个、至少19个、至少20个、至少21个或至少22个连续核苷酸。在一些实施方案中，所述互补的区域与CTNNB1的靶标序列完全互补。在一些实施方案中，与CTNNB1互补的区域的长度为至少19个连续核苷酸。

在一些实施方案中，所述反义链长度为19至27个核苷酸。在一些实施方案中，所述反义链长度为21至27个核苷酸。在一些实施方案中，所述寡核苷酸进一步包含长度为15至40个核苷酸的有义链，其中所述有义链与所述反义链形成双链体区域。在一些实施方案中，所述有义链长度为19至40个核苷酸。在一些实施方案中，所述反义链长度为27个核苷酸，且所述有义链长度为25个核苷酸。在一些实施方案中，所述双链体区域长度为至少15个、至少16个、至少17个、至少18个、至少19个、至少20个或至少21个核苷酸。在一些实施方案中，所述反义链和所述有义链形成长度为25个核苷酸的双链体区域。