[发明专利]CAR-T细胞与自身免疫性疾病

说明书

表达嵌合抗原受体(CAR)的Treg特异性靶向RA患者的关节中存在的抗原，以诱导局部化且有效的免疫抑制反应。

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2018年2月11日提交的美国临时申请号62/629,103的优先权的权益，其通过引用以其全文并入本文。

技术领域

本发明的实施方案涉及嵌合抗原受体(CAR)、嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，以及在疾病如自身免疫性疾病的治疗中的用途。

背景技术

传统上，抗原特异性T细胞是通过选择性扩增对靶抗原具有天然特异性的外周血T细胞产生的。然而，选择和扩增大量对大多数癌症和自身抗原具有特异性的T细胞是困难的，并且常常是不可能的。使用整合载体的基因疗法为这个问题提供了解决方案，因为嵌合抗原受体(CAR)的转基因表达允许通过大量外周血T细胞的离体病毒载体转导产生大量对任何表面抗原具有特异性的T细胞。

发明内容

本发明的实施方案部分针对特异性识别与自身免疫性疾病相关的抗原的嵌合抗原受体(CAR)。特别地，CAR对翻译后修饰的抗原具有特异性。CAR被转导至抑制自身免疫应答或细胞毒性T细胞的T细胞，如调节性T细胞中。

因此，在本发明的一个方面，提供了嵌合抗原受体(CAR)，其包含抗原特异性结合结构域、铰链结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和CD3ζ信号传导结构域，其中所述抗原特异性结合结构域特异性结合经修饰的多肽或其肽，包括瓜氨酸化蛋白，如瓜氨酸化细胞外基质蛋白和瓜氨酸化细胞表面蛋白。

在本发明的第二方面，提供了嵌合抗原受体(CAR)，其包含抗原特异性结合结构域、铰链结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和CD3ζ信号传导结构域，其中所述抗原特异性结合结构域特异性结合瓜氨酸化波形蛋白(CV)多肽或其肽。

在第三方面，本发明提供了分离的T细胞，其被修饰以表达：嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体包含连接至至少一个共刺激结构域和CD3ζ信号传导结构域的抗原结合结构域，其中所述抗原结合结构域包含特异性结合瓜氨酸化波形蛋白(CV)的单链可变片段(scFv)。在某些实施方案中，抗原结合结构域包含抗体、抗体片段、骆驼科动物纳米抗体或适体。

在某些实施方案中，铰链结构域由与SEQ ID NO:8具有至少50％序列同一性的核酸序列编码；跨膜结构域由与SEQ ID NO:9具有至少50％序列同一性的核酸序列编码；CD3ζ信号传导结构域由与SEQ ID NO:10具有至少50％序列同一性的核酸序列编码；和/或；CD28共刺激结构域由与SEQ ID NO:11具有至少50％序列同一性的核酸序列编码。

在某些实施方案中，铰链结构域由与SEQ ID NO:8具有至少75％序列同一性的核酸序列编码；跨膜结构域由与SEQ ID NO:9具有至少75％序列同一性的核酸序列编码；CD3ζ信号传导结构域由与SEQ ID NO:10具有至少75％序列同一性的核酸序列编码；和/或；CD28共刺激结构域由与SEQ ID NO:11具有至少75％序列同一性的核酸序列编码。

在某些实施方案中，铰链结构域由与SEQ ID NO:8具有至少95％序列同一性的核酸序列编码；跨膜结构域由与SEQ ID NO:9具有至少95％序列同一性的核酸序列编码；CD3ζ信号传导结构域由与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性的核酸序列编码；和/或；CD28共刺激结构域由与SEQ ID NO:11具有至少95％序列同一性的核酸序列编码。

在某些实施方案中，铰链结构域由SEQ ID NO:8的核酸序列编码；跨膜结构域由SEQ ID NO:9的核酸序列编码；CD3ζ信号传导结构域由SEQ ID NO:10的核酸序列编码；和/或；CD28共刺激结构域由SEQ ID NO:11的核酸序列编码。