[发明专利]制备免疫原性组合物的方法

权利要求书

1.一种制备包含重组蛋白的免疫原性组合物的方法，其中所述方法包含以下步骤：

(a)提供含有以下的混合物：

-第一液体，及

-重组PCV2 ORF2蛋白和/或包含多个重组PCV2 ORF2蛋白的病毒样颗粒，

(b)通过从步骤(a)产生的混合物去除所述第一液体的一部分来浓缩所述混合物中的重组PCV2 ORF2蛋白和/或所述病毒样颗粒，及

(c)通过连续渗滤处理从步骤(b)产生的溶液。

2.权利要求1的方法，其中步骤(a)的所述混合物另外含有或进一步包含

-包含编码所述重组PCV2 ORF2蛋白的核酸序列的载体，其中所述载体已被灭活剂灭活，和/或

-灭活剂，其已被中和剂中和，和/或

-中和剂，

和/或其中在步骤(c)中，通过连续渗滤处理从步骤(b)产生的溶液，使得处理溶液中经中和的灭活剂的浓度和/或中和剂的浓度降低。

3.一种制备包含重组PCV2 ORF2蛋白的免疫原性组合物的方法，特别是权利要求2的方法，其中所述方法包含以下步骤：

(a)(i)提供含有以下的混合物：

-第一液体，

-重组PCV2 ORF2蛋白和/或包含多个重组PCV2 ORF2蛋白的病毒样颗粒，及

-包含编码所述重组蛋白的核酸序列的载体；

(ii)通过向步骤(i)的混合物中添加灭活剂灭活所述载体；

(iii)通过向从步骤(ii)产生的混合物添加中和剂中和所述灭活剂；

(b)通过从步骤(a)(iii)产生的混合物去除所述第一液体的一部分来浓缩所述混合物中的重组PCV2 ORF2蛋白和/或所述病毒样颗粒，及

(c)通过连续渗滤处理从步骤(b)产生的溶液，使得处理溶液中经中和的灭活剂的浓度和/或中和剂的浓度降低。

4.权利要求1至3中任一项的方法，其中在步骤(b)中，从所述混合物去除所述第一液体的一部分由用至少一个过滤器过滤所述混合物组成或包含用至少一个过滤器过滤所述混合物，其中所述至少一个过滤器优选包含滤膜。

5.权利要求2至4中任一项的方法，其中在步骤(b)中，所述浓缩包含：

-将所述混合物进料至包含至少一个过滤器的过滤器系统，其中所述至少一个过滤器包含滤膜，所述滤膜具有允许所述经中和的灭活剂和/或所述中和剂穿过、同时保留总体流中的所述重组PCV2 ORF2蛋白和/或所述病毒样颗粒的膜孔径，及

-排出包含所述经中和的灭活剂和/或所述中和剂的渗透物，

和/或其中在步骤(c)中，所述连续渗滤包含

-将所述溶液进料至包含至少一个过滤器的过滤器系统，其中所述至少一个过滤器包含滤膜，所述滤膜具有允许所述经中和的灭活剂和/或所述中和剂穿过、同时保留总体流中的所述重组PCV2 ORF2蛋白和/或所述病毒样颗粒的膜孔径，及

-排出包含所述经中和的灭活剂和/或所述中和剂的渗透物，

-以等于渗透物流的速率向所述总体流添加第二液体，其中所述第二液体不同于所述第一液体。

6.权利要求4或5的方法，其中所述至少一个过滤器是至少一个平板过滤器和/或至少一个中空纤维过滤器，且其中所述至少一个平板过滤器优选是至少一个盒式过滤器，

和/或其中所述至少一个过滤器是2-8个过滤器、优选5-7个过滤器，

和/或其中所述至少一个过滤器中的每一者具有约16-26m²、优选约20-22m²的总过滤器面积，

和/或其中所述滤膜具有小于所述重组PCV2 ORF2蛋白和/或所述病毒样颗粒的平均孔径，和/或其中所述滤膜具有介于约200kDa与约500kDa之间的分子量截止值，

和/或其中所述滤膜由选自以下的材料组成或包含选自以下的材料：聚醚砜、纤维素水合物、再生纤维素、稳定纤维素、交联纤维素、交联纤维素水合物、乙酸纤维素、聚酰胺、聚氨基甲酸酯、聚丙烯、聚砜、聚碳酸酯、尼龙、聚酰亚胺及其组合，

和/或其中所述滤膜优选由聚醚砜组成或包含聚醚砜，或其中所述滤膜任选地是基于稳定纤维素的膜。