[发明专利]使用WNT激动剂和生物活性脂质用于生成和扩增心肌细胞的试剂和方法

说明书

本发明提供了用于扩增搏动的心肌细胞的方法，包括用一种或多种Wnt激动剂、一种或多种生物活性脂质或一种或多种Wnt激动剂与一种或多种生物活性脂质的组合处理搏动的心肌细胞。本发明提供了用于将包括iPS细胞的干细胞分化为搏动的心肌细胞的方法，包括用一种或多种Wnt激动剂与一种或多种生物活性脂质的组合处理iPS细胞。本发明提供了用于再生医学的组合物和试剂盒，其包含搏动的心肌细胞、一种或多种Wnt激动剂和一种或多种生物活性脂质。

本发明是在美国国立卫生研究院授予的NIH基金LM012179和U01 HL099776的政府支持下完成的。美国政府享有本发明的某些权利。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年3月16日提交的美国临时专利申请62/644,091的优先权权益，其全部公开内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及用于扩增搏动的心肌细胞的试剂、组合物和方法。本发明还涉及用于从包括iPS细胞的各种干细胞产生心肌细胞的组合物和方法。本发明还涉及其中可以使用这些心肌细胞的各种应用，包括心脏病的治疗和高通量药物筛选、心脏疾病建模、精密医学和再生疗法。

背景

心肌梗塞(MI)后，人的心脏可能会失去大约十亿个心肌细胞(CM)，从而导致急性心脏功能障碍，并使患者处于发展慢性心力衰竭的风险中。已证明，成年哺乳动物心脏表现出有限的自身再生能力，并且目前的治疗方法(包括注射hiPSC-CM或使用工程化的心脏组织创建心脏补片)受到移植后细胞死亡和细胞受体中心律不齐的困扰((Beltrami等人,2001；Chong等人,2014；Senyo等人,2013)。不同于成年CM，胎儿CM是增殖性的并经历充分的有丝分裂，这解释了胚胎发育过程中的指数性心肌生长(de Boer等人,2012；Risebro等人,2015)。虽然新生儿心脏具有在各种形式的损伤后再生的能力，但这种能力在出生后不久即丧失，导致成年期受损时心肌质量的显著和永久性丧失((Foglia and Poss,2016；Laflamme and Murry,2011；Porrello等人,2011；Uygur and Lee,2016)。