[发明专利]检测MAGEA4的方法

权利要求书

1.检测样品中的MAGEA4的方法，所述方法包括：

以2μg/ml至20μg/ml范围的浓度向所述样品添加抗MAGEA4抗体；

孵育所述抗体和所述样品；以及

检测与所述样品结合的抗体，其中，所述抗体为OTI1F9。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体的浓度为4μg/ml至15μg/ml，4μg/ml至10μg/ml、5μg/ml至13μg/ml、6μg/ml至12μg/ml或7μg/ml至11μg/ml。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抗MAGEA4抗体的浓度为10μg/ml。

4.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，将所述样品和所述抗MAGEA4抗体在33℃至39℃、34℃至38℃、35℃至37℃、35℃、36℃或37℃下孵育30分钟至60分钟、25分钟至50分钟、25分钟至39分钟、27分钟至35分钟、28分钟至34分钟、30分钟至33分钟、31分钟、32分钟或33分钟。

5.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，将所述样品和所述抗MAGEA4抗体在36℃下孵育32分钟。

6.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，通过二抗间接地检测与所述样品结合的抗MAGEA4抗体，所述二抗与所述抗MAGEA4抗体结合。

7.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，使所述二抗与辣根过氧化物酶缀合。

8.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，还包括在向所述样品添加所述抗MAGEA4抗体之前进行表位修复步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述表位修复步骤的温度为80℃至110℃、90℃至100℃或92℃至108℃，和/或所述表位修复步骤的持续时间为10分钟至30分钟、12分钟至28分钟、13分钟至27分钟、14分钟至26分钟、15分钟至25分钟、16分钟至24分钟、17分钟至23分钟、18分钟至22分钟。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的方法，其特征在于，所述表位修复步骤在95℃下执行20分钟。

11.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，还包括可选地通过使所述样品与DAB(3,3’-二氨基联苯胺)接触来抑制所述样品中的内源性过氧化物酶活性。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，使所述样品与所述DAB抑制剂在室温下接触至少5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟或11分钟，优选地，接触至少8分钟。

13.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，还包括可选地在抑制内源性过氧化物酶活性之后，使所述样品接触封闭试剂的步骤。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，使所述样品与所述封闭试剂接触8分钟至16分钟、9分钟至15分钟、10分钟至14分钟或11分钟至13分钟和/或在33℃至39℃、34℃至38℃、35℃至37℃下接触。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，使所述样品与所述封闭试剂在36℃下接触12分钟。

16.根据任一前述权利要求所述的方法，其特征在于，所述样品嵌在石蜡中。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，还包括脱石蜡的步骤。