[发明专利]用于组织和细胞的多重分析的顺序染色

说明书

提供了包括复数个分析物检测剂的组合物和方法，每个分析物检测剂包括可操作地连接至分析物检测剂的不稳定标签，每个不稳定标签包括与另一个不稳定标签不同的信号，每个分析物检测剂靶向不同分析物。

相关申请

本申请要求于2018年1月30日提交的美国临时申请号62/623,866的权益，出于所有目的将通过引用整体并入本文。

序列表

本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用整体并入本文。于2019年1月29日创建的ASCII副本名为14904-446Sequence sequence_ST25.txt，大小为12KB。

技术领域

本公开涉及与用于对样品中的多种分析物进行顺序染色和分析的检测试剂有关的组合物，以及使用该组合物的方法，尤其涉及用于检测样品中的多种分析物的的试剂和方法，包括不稳定标签。

背景技术

需要通过成像来标签和分析细胞、组织，和生物样本上的多种分析物。当前可用的技术具有缺点，包括在单个样品中可标记和识别的分析物的数量。

当前，基于光学显微镜的技术通常用于探测样本(细胞、组织，和其它生物样本)中的分析物。通常，将这些样品放置在平面基板(例如载玻片)上，并用试剂(例如荧光标记的抗体)探测。但是，样品上只能分辨出几种不同的荧光标记，因此限制了每个样品中可以测定的独立的测量或分析物的数量。常用的技术只能对单个样品中的一到四种分析物进行测量，而最近的一些报告建议最多测量10种分析物(Remark et al.,Science Immunology,2016；Carstens et al,Nature Comm.,2017)。

需要用于分析同一样品上的更多分析物的试剂和方法。

发明内容

在一方面，提供了组合物。所述组合物包括复数个分析物检测剂，每个分析物检测剂包含可操作地连接至所述分析物检测剂的不稳定标签，每个不稳定标签包括与另一个不稳定标签不同的信号，每个分析物检测剂靶向不同分析物。每个不稳定标签是可移除的或可淬灭的，而不会破坏施加了所述复数个分析物检测剂的样品，并允许使用第二复数个分析物检测剂对样品进行进一步分析。

在另一方面，提供了一种用于分析样品的方法。所述方法包括用复数个分析物检测剂标记样品，每个分析物检测剂包括可操作地连接所述分析物检测剂的不稳定标签，每个不稳定标签包括与另一个不稳定标签不同的信号，每个分析物检测剂靶向不同分析物。该方法还包括检测由样品上的复数个分析物检测剂中的每一个所产生的信号，从每种分析物检测剂中去除所述信号；以及重复步骤a-c。

附图说明

图1A示出了根据本公开的SeqProbe的实施例的图。

图1B示出了根据本公开的SeqProbe的替代实施例的图。

图2示出了具有基于金属的交联剂的SeqProbe的实施例的图。

图3A-3D示出了根据本发明的带有不同标签剂的SeqStain探针的实施例的图。

图4A-4D示出了根据本发明的带有不同标签剂的SeqStain探针的实施例的图。

图5A-5B示出了具有用于标签剂的不同附接手段的SeqStain探针的实施例的图。

图6示出了根据本公开的从分析物识别剂去除标签剂的方法的实施例。

图7A-7D示出了根据本公开的去除标签剂的方法。

图8示出了用于减少SeqProbe的信号的方法的实施例。