[发明专利]包含双链miRNA的双螺旋寡核苷酸构建体及其用途

说明书

本发明涉及一种包含双链miRNA的双螺旋寡核苷酸构建体，以及一种用于预防或治疗癌症的包含所述双螺旋寡核苷酸构建体的组合物。更具体地，本发明涉及一种包含miR‑544a的双螺旋寡核苷酸构建体，其是通过有效抑制癌细胞的增殖或诱导癌细胞的自愿死亡的方法来表征的，以及一种包含所述构建体的抗癌组合物。

技术领域

本发明涉及一种包含双链miRNA的双链寡核苷酸结构，以及一种包含所述结构的用于癌症预防或治疗的组合物。更具体地，本发明涉及一种包含miR-544a的双链寡核苷酸结构，所述双链寡核苷酸结构有效地抑制癌细胞增殖或诱导癌细胞凋亡；并且涉及一种包含所述结构的抗癌组合物。

背景技术

作为用于治疗由基因控制异常引起的疾病(通常是被称为癌症的疾病)的有效且传统的方法，已经使用了通过手术切除来去除肿瘤的方法。然而，在原发癌转移到其他器官的情况下，不可能进行手术切除，并且已经使用了抗癌化学疗法。作为用于化学疗法的抗癌剂，主要使用通过有机或无机方法合成的单分子化合物。此类抗癌药物已被开发出并用于抵抗癌症疾病，以便主要有效地靶向通过使信号传导途径中所包含的磷酸化激活蛋白过表达而扰乱信号传导途径的蛋白质，从而抑制所述蛋白质的活性。

在抗癌药物开发的最近趋势中，已经开发了靶向治疗剂，所述靶向治疗剂靶向引起癌症的驱动突变并且选择性地抑制由所述驱动突变产生的蛋白质的活性。85％至90％的肺癌是非小细胞肺癌，所述非小细胞肺癌可细分为鳞状细胞癌和腺癌。作为影响腺癌存活率的主要遗传突变，占约30％的KRAS突变和占约15％的EGFR突变是已知的。具体地，靶向突变的EGFR蛋白的靶向治疗剂已被开发出并在临床上使用，并且所述靶向治疗剂的例子包括厄洛替尼(erlotinib)(商品名：Tarceva)和吉非替尼(gefitinib)(商品名：Iressa)。尽管这些靶向治疗剂可从具有EGFR突变的肺癌患者产生高应答率，但据报道，在大多数情况下，对这些药物的耐药性会在一年内被诱导出。据报道，这种耐药性是由除了现有的EGFR突变之外，EGFR蛋白中的T790M突变，或者包括在EGFR信号传导途径下游的基因(诸如RAF和PI3K)的突变引起的。包含这种单分子的肺癌治疗药物具有严重局限，诸如诱导耐药性。

已经以各种方式尝试开发治疗药物来代替传统的化学疗法。此类尝试中的一种是使用小干扰RNA(以下称为siRNA)(Iorns,E等人，Nat Rev Drug Discov第6卷，第556-68页.2007.)。siRNA是由16至27个核苷酸组成的单链RNA并且充当细胞中被称为RNA诱导沉默复合物(RISC)的核糖核蛋白复合物的一种组分(Tomari,Y等人，Genes Dev第19卷，第517-29页，2005；Chu,C.Y等人，RNA第14卷，第1714-9页，2008；Mittal,V.Nat Rev Genet第5卷，第355-65页，2004；Reynolds,A.等人，Nat Biotechnol第22卷，第326-30页.2004)。RISC用作RNA剪刀以切割信使RNA(在下文中称为mRNA)，从而抑制从mRNA产生蛋白质。RISC中含有的siRNA可与具有与siRNA序列互补的序列的mRNA结合以形成双链RNA，并且RISC可充当RNA剪刀以切割靶mRNA，以便使该mRNA无法充当重复产生蛋白质的模板。