[发明专利]一种高含量商陆皂苷甲的制备方法

说明书

本发明提供一种高含量商陆皂苷甲的制备方法，该方法包括：1)取商陆皂苷甲粗品，加入二甲基甲酰胺和第一非极性溶剂的混合溶剂中，搅拌，加热溶解，得到商陆皂苷甲的粗品溶液；2)过滤，除去不溶性杂质，收集滤液；3)向步骤2)的滤液中再加入第二非极性溶剂，不断搅拌下，加热到一定温度后，保温一段时间；4)冷却，结晶，过滤，使用第三非极性溶剂洗涤晶体，干燥，即得。该方法操作简单、条件温和，无需采用柱层析处理，并避免使用毒性较大的溶剂，适合规模化生产，所制备得到的商陆皂苷甲的含量在97％以上，且收率高，具有巨大的经济优势。

技术领域

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种高含量商陆皂苷甲的制备方法。

背景技术

商陆皂苷甲(Esculentoside A)，别名为：商陆皂苷A，化学名称为：(2b,3b,4a,20b)-3-((4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-木吡喃糖基)氧基)-2,23-二羟基油烷-12-烯-28,29-二酸29-甲基酯((2b,3b,4a,20b)-3-((4-O-beta-D-Glucopyr anosyl-beta-D-xylopyranosyl)oxy)-2,23-dihydroxyolean-12-ene-28,29-dioic acid29-methylester)，分子式为：C₄₂H₆₆O₁₆，分子量为：826.96，是商陆科植物商陆(Phytolacca acinosaRoxb)根的提取物，通常为针状结晶，无色，无味，易溶于热水、热甲醇、乙醇和正丁醇，难溶于丙酮、乙醚等亲脂性溶剂，化学结构式如式(Ⅰ)所示：

从1984年Kassanis等从商陆中提取得到一种抗病毒的糖蛋白后，国内外对商陆的化学成份研究愈来愈多。迄今为止，已从商陆中分离出超过50种的化学成分，包括多种水溶性成份、三萜类皂苷及其配糖体、两种酸性杂多糖、脂溶性成分、蛋白多肽及微量元素等。商陆皂苷甲为三萜类皂苷，多项研究表明，具有抗炎、免疫增强、抗肿瘤等多种药理作用，在临床上用于治疗慢性气管炎等症取得了良好的效果；并有报道，商陆皂苷甲也是类风湿性关节炎、对乙酰氨基酚(APAP，Acetaminophen)所致肝损伤的潜在有效药物。

然而，商陆总皂苷中含有结构相似的其它成分以及杂质，商陆皂苷甲的制备分离比较困难。现有文献报道的商陆皂苷甲的制备方法一般采用大孔树脂及硅胶柱层析的方法分离，经硅胶柱色谱、C18反相柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱等手段获得商陆皂苷甲；或大孔树脂、常压柱层析、反复硅胶柱层析分离获得商陆皂苷甲；这样的方法工艺繁琐，成本高，回收率低。

易杨华等人在《商陆有效成分的研究/I.三萜皂苷的分离与鉴定》(中草药，1984年02期，p7-11)中对四种商陆皂苷进行了研究，同时提供了一种商陆皂苷甲的制备方法：取商陆总皂苷，经硅胶柱层析，氯仿-甲醇(8.5：1.5)洗脱，收集商陆皂苷甲流份，浓缩，干燥，得到商陆皂苷甲。该方法的不足之处在于：1)采用硅胶柱层析分离，操作繁琐，产能低；2)需要使用大量的氯仿和甲醇进行洗脱，而氯仿和甲醇均具有较大毒性，不利于工业化生产，并且还可能残留在产物中，增加人们用药风险。

CN102250196A公开了一种商陆皂苷甲的制备方法，该方法经过超临界萃取、大孔吸附树脂柱吸附及洗脱、高速逆流色谱分离纯化，最后冻干得到高含量的商陆皂苷甲。该方法的不足之处在于：1)需要采用大孔吸附树脂柱以及高速逆流色谱进行分离纯化，操作繁琐，产能低；2)高速逆流色谱分离纯化以及冻干步骤，对设备均有较高的要求，能耗高，生产成本高。

结晶法，是利用混合物中各成分在同一溶剂体系中溶解度的不同或在冷热情况下溶解度显著差异，将目标组分分离出来的操作方法，被广泛的应用于化合物的分离及纯化。