[发明专利]质谱检测乳制品中A1、A2型β酪蛋白的质谱模型及其构建方法

权利要求书

1.一种用于质谱检测乳制品中A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的质谱模型，该质谱模型包括A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽组，其中所述乳制品包括牛乳、羊乳，所述A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示。

2.权利要求1所述的质谱模型，其中所述A1β-酪蛋白的特征多肽质谱峰值为单电荷5360m/z(5‰)或双电荷2680m/z(5‰)，当出现该单电荷或双电荷的质谱多肽峰值时，表示待检样品为A1型乳，或A1/A2杂合型乳。

3.权利要求1或2所述的质谱模型，其中所述A2β-酪蛋白的特征多肽峰质谱峰值为单电荷5320m/z(5‰)或双电荷2660m/z(5‰)，当出现该单电荷或双电荷的质谱多肽峰值时，表示待检样品为A2型乳，或A1/A2杂合型乳。

4.制备权利要求1-3任一所述的质谱模型的构建方法，包括：

1)收集多例普通纯牛奶(含A1型或A1/A2杂合型)和A2型牛奶作为两组标本备用；

2)对牛奶蛋白进行质谱前预处理；

3)对预处理过的两组牛奶蛋白进行质谱检测读取，获得两组牛奶多肽的指纹图谱；

4)对所有的普通纯牛奶(含A1型或A1/A2杂合型)和A2型牛奶的指纹图谱进行标准化处理，并收集数据；

5)对所得数据进行质控处理，筛选出具有下列质荷比峰的两个特征多肽：单电荷5360m/z(5‰)或双电荷2680m/z(5‰)、单电荷5320m/z(5‰)或双电荷2660m/z(5‰)，对所述特征多肽进行测序并确定其序列为SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2所示，并根据这两个质荷比峰建立检测乳品定性及半定量的质谱模型。

5.权利要求1的构建方法，其中步骤2)预处理的方法包括使用胰蛋白酶酶解，得到乳品中的特异多肽片段。

6.权利要求1的构建方法，其中所述步骤3)采用试剂盒对两组乳品样本进行还原、烷基化及酶解处理，并对乳品酶解后的多肽片段进行读取，获得两组乳品多肽的指纹图谱。

7.权利要求1的构建方法，其中所述步骤5)所述的质控处理，保留信噪比大于3的质谱图谱数据，并采用组内变异系数来保证实验的一致性，从而根据变异系数满足一致性的允许范围来进行筛选，所述变异系数为15％。