[发明专利]一种粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法

权利要求书

1.一种粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.采集感染有幽门螺杆菌的患者的新鲜粪便样本作为原材料放入第一离心管中；

S2.羟基磁珠提取粪便中的幽门螺杆菌DNA：粪便样本中加入生理盐水和异硫氰酸胍裂解液，粪便样品涡旋振荡至均质化后置于恒温混匀仪中，混匀后在12000rpm的条件下离心5min使粪便颗粒沉淀，取上清液至第二离心管中，加入蛋白酶K和5％SDS溶液，涡旋振荡后置于恒温混匀仪中，混匀后加入异丙醇和表面经硅羟基包被的磁珠，涡旋振荡后置于恒温混匀仪中，混匀后将第二离心管置于磁力架上，静置至磁珠全部吸附，弃去溶液后向第二离心管中加入洗涤液a，静置至磁珠全部吸附，弃去溶液后向第二离心管中加入洗涤液b，吹匀后置于磁力架上，静置至磁珠全部吸附，弃去溶液后静置第二离心管至液体全部挥发，向第二离心管中加入ddH2O，吹匀后置于恒温混匀仪中，瞬离第二离心管后置于磁力架上，静置至磁珠全部吸附，吸取第二离心管中的处理液至第三离心管中；

S3.羧基磁珠提取处理液中的幽门螺杆菌DNA：向第三离心管中加入羧基磁珠，涡旋振荡后于室温下静置5min，将第三离心管放于磁力架上，直至磁珠完全吸附，避免接触磁珠的情况下弃去第三离心管中的溶液，向第三离心管中加入80％乙醇，待悬起的磁珠完全吸附后弃去第三离心管中的溶液，静置10min至乙醇完全挥发后加入ddH20，涡旋振荡使磁珠完全重悬于ddH20中后，室温下静置5min，将第三离心管放于磁力架上，直至磁珠完全吸附，将洗脱液转移至第四离心管中，即得到纯净的DNA。

2.根据权利要求1所述的粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，其特征在于，步骤S2中异硫氰酸胍裂解液的浓度为5mol/L。

3.根据权利要求2所述的粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，其特征在于，步骤S2中洗涤液a包括3M盐酸胍、10mM Tris和50％乙醇，洗涤液a的pH至为8.0。

4.根据权利要求3所述的粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，其特征在于，步骤S2中洗涤液b包括10mM Tris和80％乙醇。