[发明专利]一种核酸提取试剂盒及提取核酸的方法在审
| 申请号： | 201911413714.4 | 申请日： | 2019-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN111041024A | 公开（公告）日： | 2020-04-21 |
| 发明（设计）人： | 郭文浒;张书祖;薛怡婷;陈浩 | 申请（专利权）人： | 阿吉安（福州）基因医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 福州市博深专利事务所(普通合伙) 35214 | 代理人： | 段惠存 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 提取 试剂盒 方法 | ||
1.一种核酸提取试剂盒，其特征在于，包括裂解液、洗涤液I和洗涤液II；所述裂解液包括Tris、EDTA、Tween20、二硫苏糖醇和异硫氰酸胍。
2.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括5-100mmol/L的Tris、1-200mmol/L的EDTA、体积百分数含量为0.1-5％的Tween20、1-5mol/L的二硫苏糖醇和3-5mol/L的异硫氰酸胍。
3.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液I包括5-6mol/L的异硫氰酸胍，1-200mmol/L的EDTA，以及质量百分数为30-50％的乙醇或40-80％的异丙醇。
4.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液II包括20-200mmol/L的NaCl，以及质量百分数为70-100％的异丙醇或乙醇。
5.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括5-40mmol/L的Tris。
6.一种提取核酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、将裂解液、核酸附着物和待提取样品混合，得到吸附有核酸的核酸附着物；
步骤2、依次采用洗涤液I、洗涤液II和洗脱液清洗吸附有核酸的核酸附着物，每次清洗后固液分离并收集上清液，取洗脱液固液分离后的上清液，得到核酸；
所述裂解液包括Tris、EDTA、Tween20、二硫苏糖醇和异硫氰酸胍；
所述洗脱液为无核酸水。
7.根据权利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述裂解液包括5-100mmol/L的Tris、1-200mmol/L的EDTA、体积百分数含量为0.1-5％的Tween20、1-5mol/L的二硫苏糖醇和3-5mol/L的异硫氰酸胍。
8.根据权利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述洗涤液I包括5-6mol/L的异硫氰酸胍，1-200mmol/L的EDTA，以及质量百分数为30-50％的乙醇或40-80％的异丙醇；所述洗涤液II包括20-200mmol/L的NaCl，以及质量百分数为70-100％的异丙醇或乙醇；所述裂解液包括5-40mmol/L的Tris。
9.根据权利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述核酸附着物为磁珠、电化学芯片或吸附膜。
10.根据权利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述步骤1中裂解液、核酸附着物和待提取样品混合的温度为10-40℃，混合的时间为2-8min。
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