[发明专利]基于重组皮肤模型的光致敏性评价方法

权利要求书

1.一种基于重组皮肤模型的光致敏性评价方法，所述方法包括以下步骤：

S1.复苏重组皮肤模型；

S2.涂抹受试物；

S3.清洗受试物；

S4.选取光源；

S5.评价光致敏性；

其中，所述评价光致敏性包括：

利用双末端测序法分析全基因组，通过与未照射组比较致敏相关基因上调个数来评价受试物的光致敏性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述复苏重组皮肤模型包括：

在6孔板中培养重组皮肤模型，每孔中1个重组皮肤模型，每孔添加900μL复苏液，置于温度为36-38℃、相对湿度为92-95%和4-6% CO₂的培养箱中孵育55-65min后，更换复苏液，过夜孵育18-22h，在复苏过程中，将损坏的以及表面上存在大量水分的重组皮肤模型丢弃，复苏结束后对重组皮肤模型表观进行评价，表观正常后进行后续操作。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述光源为波长为320-400nm的UVA。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述UVA的剂量为0.5-60J/cm²。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述涂抹受试物包括：

用移液枪吸取20-60μL受试物，然后垂直将受试物加到重组表皮模型的表皮表面，再用带有软胶头的涂抹棒，轻轻涂抹重组皮肤模型表面的受试物，使其均匀分布于重组皮肤模型表面，再将涂抹有受试物的重组表皮模型置于温度为36-38℃、相对湿度为92-95%和4-6%CO₂的培养箱中培养20-60min。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述清洗受试物包括：

用装有PBS的无菌洗瓶清洗重组皮肤模型表面残留的受试物，轻轻吹打清洗10-20次，对于较为粘稠的受试物，先用棉签将表面残留物擦拭，再用装有PBS的无菌洗瓶清洗。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述重组皮肤模型为重组皮肤模型Epikutis。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试物包括能够形成分散体系的化学品、不能形成分散体系的化学品和油状或膏状的化妆品成品。

9.根据权利要求2所述的方法，其中，所述表观正常表现为重组皮肤模型表面无气泡、无褶皱、不潮湿。