[发明专利]一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺

权利要求书

1.一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于包括以下步骤：

(1)试管斜面菌种制备：

斜面培养基包括蔗糖3％、硝酸钠0.2％、磷酸氢二钾0.1％、硫酸镁：0.05％氯化钾0.05％、硫酸亚铁0.01％、琼脂2％，调节Ph6.0～6.2，电炉上加热煮沸充分溶解，用玻璃移液管吸培养基分装到的玻璃试管中，塞好棉塞，用纸包好，在121℃、0.1Mpa条件下灭菌30min，灭菌完成后试管倾斜置于超净台内，冷却凝固，斜面占试管长度的2/3，将黑曲霉菌株接种到试管斜面培养基进行培养；

(2)摇瓶菌种制备：

摇瓶培养基包括葡萄糖4％、酵母粉0.3％、豆饼粉1％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.02％，控制Ph5.5～6.0，在121℃、0.1Mpa条件下灭菌30min，冷却，斜面试管接种于摇瓶中进行培养；

(3)种子罐菌种扩繁：

种子罐培养基包括麦芽糊精5.6％、蛋白胨3.0％、葡萄糖5.0％、麸皮4％、消泡剂0.1％，将上述配料按比例加入蒸煮罐内，加水搅拌溶解，蒸汽加热至80℃，转移到种子罐，冷却至35℃接入培养好的摇瓶菌种，培养得到成熟的液体种子；

(4)发酵培养：

以麸皮1000kg、葡萄糖20kg、硫酸铵5kg、酵母膏5kg为原料，加水800kg，充分混匀，在125℃条件下灭菌30min，冷却降温至32℃；向物料内接种液体种子，接种量为物料质量的20％，接种温度32℃；接种完成后，进行浅盘发酵培养；最后，物料烘干制粉，即得成品。

2.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的黑曲霉菌株为黑曲霉AS 3.350。

3.根据权利要求1或2所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的黑曲霉菌株的蛋白酶活力≥70000U/g。

4.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的步骤(1)中的培养条件为培养温度30℃、培养时间48小时。

5.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的步骤(2)中的培养条件为转速180r/min，培养温度31～33℃，培养时间40h。

6.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的步骤(3)中的培养条件为温度30℃±1℃、通风量12m³/h、罐压0.04Mpa～0.08Mpa、培养时间48h。

7.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的步骤(4)中的培养条件为相对湿度保持在90％、室温28℃、料温28～33℃，培养时间5天。

8.根据权利要求1所述的一种黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶的生产工艺，其特征在于：所述的步骤(4)中制粉的要求是40目筛网过筛率达到80％以上。