[发明专利]一种重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白，其特征在于，其该蛋白从N端-C端依次由人溶菌酶的氨基酸编码序列、连接肽的氨基酸编码序列和抗菌肽的氨基酸编码序列连接所得；

其中，所述人溶酶菌的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.1所示；

其中，所述连接肽的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.2所示；

其中，所述抗菌肽的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.3所示。

2.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

3.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将编码重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的碱基序列克隆至大肠杆菌表达载体pET30a的NdeI和HindIII酶切位点之间，构建重组大肠杆菌表达载体；

(2)将步骤(1)构建的重组大肠杆菌表达载体转化至大肠杆菌宿主细胞BL21中，IPTG诱导表达后，离心收集菌体，超声波裂解，离心收集包涵体沉淀；

(3)将步骤(2)收集的包涵体沉淀进行纯化，即得到重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的纯化为将包涵体沉淀用洗涤液洗涤，收集二次包涵体沉淀，再进行抽提，离心，收集上清液；利用QAE层析柱、蛋白纯化仪对收集的上清液进行纯化。

5.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白在制备抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌或枯草芽孢杆菌抗菌制剂中的应用。