[发明专利]PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒及其检测方法有效
申请号: | 201911395445.3 | 申请日: | 2019-12-30 |
公开(公告)号: | CN110964858B | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 刘云涛;郁宏伟;赵玉龙;朱秀同;吴雅清;孙颖;刘浩;尤永君;张倩;李卫东 | 申请(专利权)人: | 瑞普(保定)生物药业有限公司;天津瑞普生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理有限公司 11562 | 代理人: | 张换君 |
地址: | 071001 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | pcr 检测 分型禽腺 病毒 血清 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒,其特征在于:所述的PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒包括引物和标准品,所述的引物为上游引物和下游引物,
所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
上游引物设计于禽腺病毒基因组ITR基因序列10bp~50bp区间,下游引物设计于ORF0基因序列546bp~606bp区间;
所述标准品为禽腺病毒血清4型核酸DNA。
2.根据权利要求1所述PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括:权利要求1所述上游引物、下游引物、2×Taq Mix、标准品和PCR阴性对照;所述PCR阴性对照为双蒸水。
3.根据权利要求2所述PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒,其特征在于:所述标准品DNA模板的浓度为3 .5×103 ng/μl。
4.用于权利要求1-3任一项所述的一种PCR检测和分型禽腺病毒血清4型的试剂盒的PCR扩增体系,其特征在于:所述PCR扩增对象包括检测样品DNA、标准品和PCR阴性对照,所述PCR扩增检测体系包括25 .0μl扩增体系,其各种成分及终浓度分别为:2×Taq Mix 12.5μl,上游引物终浓度0 .5μmol/L,下游引物终浓度0 .5μmol/L,检测样品DNA、标准品或PCR阴性对照2μl,DNA-RNA Free H2O加至25μl。
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