[发明专利]固阴煎物质基准的指纹图谱测定方法和质量控制方法

权利要求书

1.一种固阴煎物质基准的指纹图谱测定方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取固阴煎物质基准粉末，以甲醇为提取溶剂，超声处理，滤过，取续滤液即得；

混合对照品溶液的制备：取各对照品，混合，加甲醇溶解，配制成混合对照品溶液；单味饮片阴性对照溶液的制备：取各单味饮片阴性粉末，以甲醇为提取溶剂，超声处理，滤过，取续滤液即得；

(2)分别吸取供试品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照溶液注入高效液相色谱仪进行测定，分别得到供试品溶液、混合对照品溶液和单味饮片阴性对照溶液的液相色谱；

(3)采用国家药典委员会制定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，对供试品溶液、混合对照品溶液和单味饮片阴性对照溶液的液相色谱进行数据匹配，即得标准指纹图谱；

所述步骤(2)的色谱条件如下：

色谱柱：Agilent 5TC-C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；

流动相：乙腈-0.3％磷酸溶液；

流速：1.0ml/min；

波长：250nm；

进样量：20μl；

柱温：40℃；

理论板数按金丝桃苷峰计算不低于7000；

梯度洗脱程序见表1：

表1 指纹图谱梯度洗脱程序

所述对照品为5-羟甲基糠醛、莫诺苷、绿原酸、马钱苷、金丝桃苷、3，6＇-二芥子酰基蔗糖、甘草酸铵和五味子醇甲对照品；

所述步骤(1)中固阴煎物质基准粉末为按国家中医药管理局发布《古代经典名方目录(第一批)》中记载的固阴煎处方经煎煮，浓缩，干燥，所得。

2.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述标准指纹图谱包括12个共有峰：峰1来自熟地黄、五味子，峰3、5、6、8来自山茱萸，峰4、7来自菟丝子，峰9来自远志，峰10、11来自甘草，峰12来自五味子，以7号峰为参照峰。

3.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述标准指纹图谱中1号峰为5-羟甲基糠醛，3号峰为莫诺苷，4号峰为绿原酸，6号峰为马钱苷，7号峰为金丝桃苷，9号为3，6＇-二芥子酰基蔗糖，11号峰为甘草酸，12号为五味子醇甲。

4.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中甲醇的体积分数为50％-75％。

5.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中滤过是采用微孔滤膜滤过。

6.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述浓缩为减压浓缩。

7.根据权利要求1所述指纹图谱测定方法，其特征在于：所述干燥为真空干燥或冷冻干燥。

8.一种固阴煎物质基准的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按照权利要求1-7任一项所述的测定方法建立固阴煎物质基准标准指纹图谱；

(2)取固阴煎标准颗粒供试样品溶液，按照权利要求1-7任一项所述测定方法步骤(2)中的色谱条件进行检测得到指纹图谱；

(3)将步骤(2)得到的指纹图谱与步骤(1)得到的标准指纹图谱进行对比，符合即为合格产品，不符合即为不合格产品。