[发明专利]一种基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱及其在筛选天然产物中活性组分的应用

权利要求书

1.一种基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱，其特征在于：所述的基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱按照如下方法进行制备：

（1）将介孔氧化硅材料与浓度为6.5~10万U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液，1mg/mL谷胱甘肽溶液，2.5mmol/L的乙酸钠缓冲液混合，冰浴下搅拌反应为2~7h，得到反应混合物过滤，室温下真空干燥，得到负载α-葡萄糖苷酶受体的介孔氧化硅材料；所述的α-葡萄糖苷酶溶液与谷胱甘肽溶液、乙酸钠缓冲液的体积比为1:1:20~30；所述的乙酸钠缓冲液的pH值为3~5；

（2）将大豆卵磷脂与胆固醇充分溶于氯仿中得到混合液；所述的大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为1~5:1；

（3）将步骤（1）所得负载α-葡萄糖苷酶受体的介孔氧化硅材料浸渍于步骤（2）所得混合液中，常温下减压旋转缓慢蒸发除去有机溶剂，负载α-葡萄糖苷酶受体的介孔氧化硅材料表面即形成一层磷脂膜；

（4）将步骤（3）得到的覆盖有磷脂膜的负载α-葡萄糖苷酶受体的介孔氧化硅材料用纯水洗涤，除去未固定的磷脂膜和酶，真空干燥箱内常温干燥除去水分和剩余有机溶剂，得到覆盖有磷脂膜的介孔固定相；

（5）以纯水为匀浆液，以覆盖有磷脂膜的介孔固定相为填料湿法装柱，即得目标产物基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱。

2.如权利要求1所述的基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱，其特征在于：步骤（1）中，干燥时间为2~3h。

3.如权利要求1所述的基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱，其特征在于：步骤（2）中，所述的氯仿的加入量以所述的大豆卵磷脂的质量计为85.7～428.6 mL/g。

4.如权利要求1所述的基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱，其特征在于：步骤（4）中，干燥时间为2~3h。

5.一种如权利要求1～4任一项所述的基于靶点蛋白的介孔生物膜色谱柱在筛选天然产物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的天然产物为五味子或西青果。