[发明专利]一种注射剂用透明质酸的制备方法

权利要求书

1.一种注射剂用透明质酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）向透明质酸终点发酵液中加入乙醇进行沉淀，静置分层后，沉淀即为透明质酸粗品；

（2）将透明质酸粗品用水溶解，然后用硅藻土或珍珠岩为助滤剂过滤，收集滤液，再用乙醇沉淀，将沉淀脱水、干燥，得精制透明质酸；

（3）将精制透明质酸用水溶解，并将pH调至6.0-7.0，过极性大孔吸附树脂柱，获得流出液1；

（4）将流出液1的pH调至5.0-6.0，过非极性大孔吸附树脂柱，获得流出液2；

（5）将流出液2过0.2μm滤芯过滤，收集滤液，再用乙醇沉淀，将沉淀脱水、干燥，得注射剂用透明质酸；

步骤（2）中，所述透明质酸粗品溶解后的浓度为0.2-1.0g/L；步骤（3）中，所述精制透明质酸的溶解浓度为0.2-1.0g/L；

步骤（3）中，所述极性大孔吸附树脂柱包括极性树脂柱和中极性树脂柱；所述极性树脂柱为XDA-8，所述中极性树脂柱为HPD-400；

步骤（4）中，所述非极性大孔树脂柱为D101；

步骤（3）和（4）中，过柱流速为0.1-3.0BV/h。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述透明质酸是指其羧基结合各种阳离子的形式。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述透明质酸的阳离子选自氢离子、钠离子、锌离子和钙离子。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）和（4）中，过柱条件为：柱温20-50℃，流速为0.2-3.0 BV/h。

5.一种注射剂用透明质酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）向透明质酸终点发酵液中加入乙醇进行沉淀，静置分层后，沉淀即为透明质酸粗品；

（2）将透明质酸粗品用水溶解，然后用硅藻土或珍珠岩为助滤剂过滤，收集滤液，再用乙醇沉淀，将沉淀脱水、干燥，得精制透明质酸；

（3）将精制透明质酸用水溶解，并将pH调至5.0-6.0，过非极性大孔吸附树脂柱，获得流出液1；

（4）将流出液1的pH调至6.0-7.0，过极性大孔吸附树脂柱，获得流出液2；

（5）将流出液2过0.2μm滤芯过滤，收集滤液，再用乙醇沉淀，将沉淀脱水、干燥，得注射剂用透明质酸；

步骤（2）中，所述透明质酸粗品溶解后的浓度为0.2-1.0g/L；步骤（3）中，所述精制透明质酸的溶解浓度为0.2-1.0g/L；

步骤（3）中，所述非极性大孔树脂柱为D101；

步骤（4）中，所述极性大孔吸附树脂柱包括极性树脂柱和中极性树脂柱；所述极性树脂柱为XDA-8，所述中极性树脂柱为HPD-400；

步骤（3）和（4）中，过柱流速为0.1-3.0BV/h。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述发酵液和乙醇的体积比为1:1.5-2.0；步骤（2）和（5）中，所述滤液和乙醇的体积比为1:1.5-2.0。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）和（5）中沉淀脱水采用有机溶剂夹带法。

8.一种如权利要求1-7任一制备方法获得的透明质酸，其特征在于，所述透明质酸产品蛋白含量≤0.01 wt %，内毒素≤0.0025EU/mg。