[发明专利]一种基于酿酒酵母的双链RNA合成优化与应用

权利要求书

1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物的结构(5'-3')如式I所示：

Z1-Z2-Z3-L1-Z4-Z5式I

其中，

Z1为无或酶切位点；

Z2为TDH3启动子；

Z3为正向的、编码dsRNA分子的核酸序列；

L1为无或核苷酸连接序列；

Z4为反向的、用于编码所述dsRNA分子的核酸序列，其中，Z3和Z4是互补形成所述的dsRNA；和

Z5为无或酶切位点，

各“-”独立地为键或核苷酸连接序列。

2.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于，所述的编码dsRNA分子的核酸序列为ofslc35b1基因。

在另一优选例中，所述的ofslc35b1基因的核酸序列选自下组：

(a)所述核酸序列如SEQ ID NO.:1所示；

(b)所述核酸序列与SEQ ID NO.:1所示的核苷酸序列有≥95％相同性，优选地≥98％，更优选地≥99％；和

(c)与(a)或(b)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。

3.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于，所述的TDH3启动子选自与SEQ ID NO:2有至少95％同源性的核苷酸序列。

4.一种载体，其特征在于，所述载体含有如权利要求1所述的核酸构建物。

5.如权利要求4所述的载体，其特征在于，所述的载体为质粒。

6.如权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体用于表达ofslc35b1基因的dsRNA。

7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求4所述的载体或其染色体中整合有外源的如权利要求1所述的核酸构建物。

8.如权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为酵母细胞。

9.一种dsRNA的生产方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：培养如权利要求7所述的宿主细胞，从而得到ofslc35b1基因的dsRNA。

10.一种如权利要求1所述的核酸构建物、如权利要求4所述的载体、或如权利要求7所述的宿主细胞的用途，其特征在于，用于制备一农用组合物，所述的农用组合物用于抑制棉田害虫。