[发明专利]一种薄壳山核桃的微体嫁接方法

说明书

本发明涉及一种薄壳山核桃的微体嫁接方法，包括接穗的准备、砧木的培育以及微体嫁接步骤，首先选取三年生嫁接苗带腋芽的茎段作为外植体，清洗消毒后切成茎段，接入腋芽诱导培养基培养，将产生的腋芽转入进行继代培养，选取无褐化现象、茎长2～4cm、带有叶片的、生长良好的无根试管苗作为接穗；取成熟薄壳山核桃种子清洗消毒后剥取种仁，切取胚轴，诱导培养后作为砧木苗，炼苗5‑10d后，采用劈接的方法进行嫁接，嫁接后将嫁接苗移至嫁接苗培养基上培养25d，然后解绑，开盖练苗一周后移栽到栽培基质中。与现有技术中薄壳山核桃的嫁接方法相比，本发明的微体嫁接方法具有嫁接成活率高、成本低、占地面积小，可有效人为操控等优点。

技术领域

本发明涉及一种薄壳山核桃的微体嫁接方法，属于林木育种技术领域。

背景技术

薄壳山核桃[Caryaillinoinensis(Wangenh.)K.Koch]又名美国山核桃或长山核桃，是胡桃科山核桃属植物。它原产美国和墨西哥北部，是世界上著名的干果树种之一。其坚果个大、壳薄，出仁率高，取仁容易，产量高。其果仁色美味香、无涩味、营养丰富，是理想的保健食品或面包、糖果等食品的添加材料。薄壳山核桃亦是重要的木本油料植物，种仁油脂含量高达70％以上，其中不饱和脂肪酸含量高达97％，是上等的烹调用油和色拉油。薄壳山核桃还是优良的材用和庭园绿化树种。薄壳山核桃不仅能为市场提供富含营养的干果、优质的木材等林产品，而且能绿化荒山、荒滩、荒地，美化环境，集经济、生态、社会三大效益于一身，其多样的产品已经成为改善人民群众饮食结构和国民经济建设的重要物质基础。

我国引种薄壳山核桃已有100多年的历史，但仍未形成大规模商品化生产，薄壳山核桃传统的繁殖方法以播种繁殖为主，但是播种实生苗10-15年后才能正常结果，由播种至结果苗龄所需的时间漫长，给栽培者造成很大压力，从而影响了薄壳山核桃种植者的积极性。而且实生繁殖不易保持其品种的优良特性，后代容易发生性状分离。因此薄壳山核桃的繁殖方法必须依靠无性繁殖来解决，目前薄壳山核桃的无性繁殖手段主要是嫁接，而嫁接技术不成熟、嫁接成活率低是限制薄壳山核桃产业化发展的主要因素之一(彭方仁，2012)。近年来，通过我国科技工作者的不懈努力，薄壳山核桃的嫁接技术已有所突破，采用改良的生长季方块芽接技术，可使薄壳山核桃的嫁接成活率达60％以上(Zhang et al,2015)，但仍然普遍存在枝接成活率不高、不同品种嫁接成活率差异明显等问题(翁春余等,2012)。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中薄壳山核桃的嫁接成活率低的问题，提供一种薄壳山核桃的微体嫁接方法。

技术方案

一种薄壳山核桃的微体嫁接方法，包括如下步骤：

(1)接穗的准备

在薄壳山核桃优良品种中，选取三年生嫁接苗带腋芽的茎段作为外植体，清洗后用70-75v％的乙醇溶液浸泡20-30s，无菌水冲洗后用0.05-0.1wt％的HgCl₂溶液消毒处理10-15min，然后用无菌水冲洗，切成1cm长的茎段，接入腋芽诱导培养基进行培养，培养15-20d后，将产生的腋芽转入继代培养基进行培养，得到无根试管苗，选取无污染、无褐化现象，茎长2～4cm、带有叶片的、生长状况良好的无根试管苗作为接穗；

(2)砧木的培育

取成熟薄壳山核桃种子，用自来水冲洗后浸泡3d，然后在无菌室内用70-75v％的乙醇溶液浸泡20-30s，无菌水冲洗后用0.05-0.1wt％的HgCl₂溶液消毒处理10-15min，用无菌水冲洗后置于超净工作台上剥去果壳，剥取种仁放入0.1％HgCl₂溶液中进行消毒，从消毒过的种仁中切取种胚，将其竖直插入种胚诱导培养基，在21-25℃、空气相对湿度保持为70-80％、全黑暗的条件下进行培养，培养25-30d后，得到组培苗，作为砧木苗；

(3)微体嫁接