[发明专利]一种尿激酶的制备方法及其冻干粉有效
| 申请号： | 201911345268.8 | 申请日： | 2019-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN110894495B | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 李尔华;顾京;赵江峰;魏文培 | 申请（专利权）人： | 江苏尤里卡生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/72 | 分类号： | C12N9/72 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 张黎 |
| 地址： | 211299 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 尿激酶 制备 方法 及其 干粉 | ||
1.一种尿激酶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)制备尿激酶粗品；(2)制备尿激酶精品；(3)提纯；
所述步骤(3)中将步骤(2)得到的尿激酶精品溶解后，将尿激酶精品溶液加入阳离子交换层析柱中进行提纯，提纯时，首先用平衡缓冲液进行冲洗，再用洗脱缓冲液进行洗脱；
所述阳离子交换层析柱中充填的填料为Capto S impAct、SP sepharose HP、source30S中的一种。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述平衡缓冲液选自：醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和Tris-HCl缓冲液中的一种；且所述平衡缓冲液中含有150-500mM氯化钠。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述洗脱缓冲液为含有500-1000mM氯化钠的醋酸盐缓冲液。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中提纯之前，调节尿激酶精品溶液的电导率为15-90ms/cm。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中提纯之前，调节尿激酶精品溶液的pH为4.5-7.5。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)包括如下步骤：首先将新鲜男性尿液加入硅胶吸附，硅胶装柱用自来水冲洗，氨水洗脱，收集洗脱液；然后将洗脱液加入固体硫酸铵中沉淀，过滤，收集滤渣，即为尿激酶粗品。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)包括如下步骤：将尿激酶粗品经过溶解、过滤后，得尿激酶精品。
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