[发明专利]一种土壤中抗生素残留检测方法

说明书

本发明提供一种土壤中抗生素残留检测方法，包括以下内容：1)供试品样品制备；2)标准品样品制备3)取标准品溶液和供试品样品注入超高效液相色谱‑串联质谱仪中进行检测；色谱条件包括：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18色谱柱；流动相：采用A：甲酸水溶液，B：乙腈作为流动相；梯度：0‑2.5min，50％A+50％B；2.5‑5min，60％A+40％B；5‑8min，75％A+25％B；8‑10min，60％A+40％B；质谱选用三重四级杆串联质谱。本发明本发明经过统计发现线性关系良好，相关系数γ＝0.9998；试验证明所建立的方法精密度高、稳定性强、重现性良好，能有效检测土壤中磺胺醋酰残留效价。

技术领域

本发明属于检测技术领域，尤其涉及土壤中抗生素残留检测方法。

技术背景

抗生素是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生长过程中所产生或由人工合成的具有抗病原体或其它活性的一类化学物质，能干扰细胞发育功能的化学物质(何良英等，2016；石奥，2016)。抗生素以前被称为抗菌素，事实上它不仅能杀灭细菌，而且对霉菌、衣原体、支原体、立克次氏体、螺旋体等其它致病微生物也有良好的抑制和杀灭作用。通俗地讲，抗生素就是用于治疗各种非病毒感染的药物(杨晓蕾，2012；杜雪，2015)。

半个多世纪以来，抗生素被广泛地应用在改善动物和人类生理健康等方面。其中兽用抗生素可治疗和预防动物疾病，还可刺激动物的生长发育，因此，抗生素在畜禽养殖和水产养殖业中使用非常普遍(高丽红等，2013；隋倩文等，2015；曹慧等，2013)。兽用抗生素被动物摄入体内后，并不能完全地将其吸收降解，甚至90％是通过尿液和动物粪便被排出体外(文一等，2015)。而随着“绿色食品”“无公害食品”的需求越来越高，以动物粪便为有机肥的使用也越来越普遍，导致抗生素在土壤中不断积累，造成抗生素抗性基因(ARGs)污染日趋严重，对环境中的生物体包括人类将产生不良的影响(邹威等，2014；苏建强等，2013)。近年来，抗生素的滥用导致了潜在的环境问题，人们对抗生素的研究日趋重视，关于土壤环境中抗生素多残留检测的研究很多，但是由于抗生素在土壤环境介质中的残留浓度较低，并且土壤环境基质成分的复杂性会对其中抗生素的含量分析带来不可忽略的影响，基质效应也成为分析抗生素多残留和评价抗生素环境风险的制约因素(许森，2015；王潇，2016)。因此，为了评价抗生素在土壤中的环境影响，建立一种可靠的、准确的同时检测多类抗生素残留的分析方法尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种土壤中抗生素残留检测方法，具有检测准确的特点。

具体的方案如下：

一种土壤中抗生素残留检测方法，包括以下内容：

1)供试品样品制备：

取待测土壤，加入提取剂，经超声、离心处理后取上清液；加热蒸发所述上清液，得浓缩液；在浓缩液中加入复溶液，待残渣全部溶解后，调节至pH为8-10，再加入分散剂和萃取剂经离心取下层液体，然后经过滤即得供试品溶液；

2)标准品样品制备：

将抗生素标准品溶解于超纯水中，并利用超纯水稀释配制成浓度在0.1mg/L-100mg/L之间不同梯度浓度的抗生素标准溶液，然后过滤，得标准品溶液，取标准品溶液采用高效液相色谱-质谱法进行检测，绘制标准曲线，并求回归方程和相关系数；

3)取上述标准品溶液和供试品样品注入超高效液相色谱-串联质谱仪中进行检测；

色谱条件包括：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18色谱柱；

流动相：采用A：甲酸水溶液，B：乙腈作为流动相；