[发明专利]一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：所述微生物秸秆降解菌剂的加工工艺包括以下步骤：

1)准备菌种Irpex lacteus、Aspergillus sydowii、Penicilliumcitrinum、Schizophyllum commune；

2)取步骤1)准备的菌种，分别进行活化、培养、发酵，得到Irpex lacteus发酵液、Aspergillus sydowii发酵液、Penicillium citrinum发酵液、Schizophyllum commune发酵液；

3)取步骤2)得到的Irpex lacteus发酵液、Aspergillus sydowii发酵液、Penicilliumcitrinum发酵液、Schizophyllum commune发酵液，按1：1：1：1浓度比例混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。

2.根据权利要求1所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：所述微生物秸秆降解菌剂的加工工艺包括以下步骤：

1)准备菌种Irpex lacteus、Aspergillus sydowii、Penicilliumcitrinum、Schizophyllum commune；

2)取步骤1)准备的菌种，分别进行活化、培养、发酵：

a)菌种活化：分别将Irpex lacteus、Aspergillus sydowii、Penicillium citrinum、Schizophyllum commune菌种在斜面中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；

b)菌种培养：分别取一环Irpex lacteus、Aspergillus sydowii、Penicilliumcitrinum、Schizophyllum commune菌种，进行初步培养，得到对应的初步种子液，再分别进行初步种子液培养，得到对应的种子液；

c)菌种发酵：取步骤b)培养后的种子液，分别进行发酵，发酵温度为25-35℃，发酵时间为10-15d，得到Irpex lacteus发酵液、Aspergillus sydowii发酵液、Penicilliumcitrinum发酵液、Schizophyllum commune发酵液；

3)取步骤2)得到的Irpex lacteus发酵液、Aspergillus sydowii发酵液、Penicilliumcitrinum发酵液、Schizophyllumcommune发酵液，按1：1：1：1浓度比例混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。

3.根据权利要求2所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：步骤2)的a)步骤中，菌种活化时的活化温度为37℃，活化时间为24h；在平板中纯化时纯化温度为37℃，纯化时间为24h。

4.根据权利要求2所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：步骤2)的b)步骤中，包括以下步骤：

A.分别取一环Irpex lacteus、Aspergillus sydowii、Penicillium citrinum、Schizophyllum commune菌种，分别接入装有种子培养基的三角瓶中，摇床培养，培养温度控制在37℃，培养时间18h，分别得到对应的初步种子液；

B.取步骤a)得到的各个初步种子液，分别接入盛有发酵培养基的三角瓶中，初步种子液的接种量为三角瓶培养基装量的4-5％，摇床培养，培养温度控制在37℃，培养时间24h，PH为7.0-7.5，得到对应种子液。

5.根据权利要求2所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：步骤2)的c)步骤中，菌种发酵时，分别将对应的种子液注入含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵，种子液的注入量为发酵罐实际装液量的1％-5％，发酵罐PH为6.5-7.5。

6.根据权利要求2所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：步骤2)的c)步骤中，菌种发酵时可通过镜检判断发酵终点，当菌体密度≥10⁸，芽孢形成率≥85％，发酵停止，得到对应的发酵液。