[发明专利]一种用于提取无内毒素质粒的磁性材料及其使用方法

权利要求书

1.一种提取无毒素质粒的试剂盒，其特征在于，包括Buffer X1～X7、磁性粒子；

所述磁性粒子外表面修饰有羟乙基纤维素，所述羟乙基纤维素修饰有季铵盐，所述季铵盐选自环氧丙基三甲基氯化铵；

所述磁性粒子的制备方法包括以下步骤：

1)将表面经季铵盐阳离子化修饰的羟乙基纤维素溶解为A液；六水合氯化铁、四水合氯化亚铁溶解为B液；

2)A液和B液混合，通入惰性气体后水浴；

3)加氨水后水浴；

4)透析；

5)离心后取上清得磁性粒子；

所述Buffer X1为Tris-HCl、EDTA和RNaseA；

所述BufferX2为NaOH、SDS；

所述BufferX3为醋酸钾、冰醋酸；

所述Buffer X4为750～800mM NaCl、12～15％乙氧基化烷基胺、90～100mM MOPS；所述Buffer X5为750～800mM NaCl、80～100mM MOPS、20～25％无水乙醇、0.15～0.2％TritonX-100；

所述Buffer X6为1～3M NaCl、70～80mM MOPS、20～25％无水乙醇；

所述Buffer X7为25～30mM磷酸氢二钾和pH 8.8～9.5磷酸二氢钾；

其中，步骤1)所述表面经季铵盐阳离子化修饰的羟乙基纤维素的制备步骤：环氧氯丙烷中通入三甲胺，搅拌反应，过滤弃上清，洗涤即得环氧丙基三甲基氯化铵；将羟乙基纤维、碱性催化剂混合后，再加入环氧丙基三甲基氯化铵，加热；所述碱性催化剂为氨水。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述环氧氯丙烷、三甲胺的摩尔比为2:0.4。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述环氧丙基三甲基氯化铵、羟乙基纤维素的比例为：4.5mM：1g。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，步骤1)所述季铵盐阳离子化修饰的羟乙基纤维素、六水合氯化铁、四水合氯化亚铁的质量比为：2:2:(1.5～2)。

5.权利要求1所述试剂盒中的磁性粒子的使用方法，其特征在于，将细菌悬浮，依次添加权利要求1中所述的BufferX1～X4，再添加预先与权利要求1中所述的BufferX5平衡的磁性粒子，磁吸弃上清，用权利要求1中所述的BufferX6洗涤，磁吸弃上清，用权利要求1中所述的BufferX7洗脱，即得不含内毒素的质粒。