[发明专利]天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法及检测方法有效
申请号: | 201911336539.3 | 申请日: | 2019-12-23 |
公开(公告)号: | CN111077245B | 公开(公告)日: | 2022-03-11 |
发明(设计)人: | 刘晓霞;丁青;陈芳;梁月仪;王利伟;陈向东;孙冬梅;魏梅;程学仁 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 向薇 |
地址: | 528244 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 天葵子 药材 uplc 特征 图谱 建立 方法 检测 | ||
1.一种天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法,其特征在于,包括如下步骤:
对照品溶液的制备:取格列风内酯对照品、紫草氰苷对照品和木兰花碱对照品,加溶剂溶解,得对照品溶液;
供试品溶液的制备:取天葵子药材粉末,加入溶剂进行提取,提取液过滤,取续滤液,得供试品溶液;所述提取的溶剂为体积分数为65~75%的甲醇水溶液,所述提取的方法为回流提取,所述提取的时间为25~35min;
将所述对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪中进行检测,所述超高效液相色谱仪采用的流动相A为甲醇,流动相B为体积分数为0.03~0.07%的磷酸水溶液,洗脱方式为梯度洗脱;
所述梯度洗脱包括如下程序:
0~12min,流动相A的体积百分比由0%上升至6%;
12~60min,流动相A的体积百分比由6%上升至80%;
所述超高效液相色谱仪采用的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
2.根据权利要求1所述的天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪的条件包括:
检测波长:255~265nm;流速:0.2~0.3 mL/min;柱温:12~18℃。
3.根据权利要求2所述的天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪的条件包括:
检测波长:260nm;流速:0.25mL/min;柱温:15℃。
4.根据权利要求1所述的天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法,其特征在于,所述供试品溶液的制备中,所述提取的溶剂为体积分数为70%的甲醇水溶液,所述提取的方法为回流提取,所述提取的时间为30min。
5.根据权利要求1-4任一项所述的天葵子药材的UPLC特征图谱建立方法,其特征在于,所述特征图谱包含12个共有峰,12个共有峰中包括格列风内酯、紫草氰苷和木兰花碱的特征峰。
6.一种天葵子药材的指标成分含量检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
指标成分对照品溶液的制备:取格列风内酯对照品和木兰花碱对照品,加溶剂溶解,配制成不同浓度的指标对照品溶液;
供试品溶液的制备:取待测天葵子药材粉末,加入溶剂进行提取,提取液过滤,取续滤液,得供试品溶液;所述提取的溶剂为体积分数为65~75%的甲醇水溶液,所述提取的方法为回流提取,所述提取的时间为25~35min;
将所述不同浓度的指标对照品溶液分别注入超高效液相色谱仪中进行检测,并构建指标成分的浓度-峰面积标准曲线;将所述供试品溶液注入超高效液相色谱仪中进行检测,并将检测图谱中的峰面积代入所述指标成分的浓度-峰面积标准曲线进行计算;
其中,所述超高效液相色谱仪采用的流动相A为甲醇,流动相B为体积分数为0.03~0.07%的磷酸水溶液,洗脱方式为梯度洗脱;
所述梯度洗脱包括如下程序:
0~12min,流动相A的体积百分比由0%上升至6%;
12~60min,流动相A的体积百分比由6%上升至80%;
所述超高效液相色谱仪采用的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
7.根据权利要求6所述的天葵子药材的指标成分含量检测方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪的条件包括:
检测波长:255~265nm;流速:0.2~0.3 mL/min;柱温:12~18℃。
8.根据权利要求7所述的天葵子药材的指标成分含量检测方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪的条件包括:
检测波长:260nm;流速:0.25mL/min;柱温:15℃。
9.根据权利要求6-8任一项所述的天葵子药材的指标成分含量检测方法,其特征在于,所述供试品溶液的制备中,所述提取的溶剂为体积分数为70%的甲醇水溶液,所述提取的方法为回流提取,所述提取的时间为30min。
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